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甲氨蝶呤联合烷化剂对Hela细胞抑制作用的MTT法及流式细胞术分析

韩静

  目的 研究均可对体外培养的 Hela 细胞产生抑制作用的甲氨蝶呤(MTX)与烷化剂(以氮芥(HN_2)为代表),两者联合使用是否具有协同效应,并初步探讨其作用机制,为临床用药提供科学依据。方法 从四个浓度水平上用 MTT 法分别测出单用 MTX、HN2及联合应用两药时的吸光度值,从而计算出细胞生长抑制率;从两个浓度水平上用碘化丙啶(PI)染色流式细胞术(FCM)检测单独用药与联合用药后,细胞周期的变化及细胞发生的凋亡。结果 分别单独使用MTX、NH_2 均可抑制体外培养的Hela细胞的生长,且会随着剂量的增大产生的抑制作用明显增强,表现为细胞抑制率增加,增殖指数降低,其中 MTX 还可以使细胞周期发生明显的变化;联合应用两药时分别比单独应用任一药物的抑制作用更大,也表现剂量依赖性的特点,经统计学处理,联合用药组与单用组对细胞的抑制率、增殖指数、细胞周期变化均有统计学差异,p <0.05,可以认为两药联合具有协同效应。结论 本实验表明,分别单用 MTX、HN_2均可对体外培养的 Hela 细胞产生抑制作用,通过流式细胞仪的检测可看到 MTX 是细胞周期特异性抑制剂,可使细胞周期发生变化,进而发生凋亡;而 HN2 是细胞周期非特异性药物,对细胞的抑制作用主要表现为使细胞死亡。联合使用两药时,由于作用时点、靶点不同,从而表现为联合用药的协同效应。……   
[关键词]:Hela 细胞;甲氨蝶呤;氮芥;MTT 法;流式细胞术
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:山西医科大学2005年