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急性肺损伤大鼠细胞信号转导机制及地塞米松保护作用的研究

林彦

  【目的】 建立油酸型急性肺损伤(ALI)模型,在此模型基础上研究急性肺损伤肺组织细胞凋亡改变及其细胞信号转导机制,探讨地塞米松在急性肺损伤早期细胞信号转导通路中的作用。【方法】(1)复制动物模型:油酸组(OG组)将SD大鼠尾静脉注入0.25ml/Kg油酸,而后用1m1生理盐水冲洗粘附于输液管内的油酸,标记后分笼饲养,分别于1h,2h,4h,6h及24h颈总动脉放血处死。对照组(CG组)尾静脉注入0.25ml/Kg生理盐水及1ml生理盐水。地塞米松治疗组(DO2h)尾静脉注入油酸0.25ml/Kg,15min后尾静脉注入地塞米松1.0mg/Kg,2h处死。(2)观察各组动脉血气、肺通透性指标及病理变化:各组取动脉血行血气分析,测定左肺湿/干比,肺系数(LI),Bradford法测支气管肺泡灌洗液(BALF)蛋白含量及肺通透性指数(PPI),显微镜下BALF细胞计数,大体病理及显微病理观察肺损伤程度。(3)检测肺组织细胞凋亡情况:免疫组织化学方法检测肺组织细胞Fas-L蛋白表达情况。(4)炎性因子的检测:放射免疫法检测大鼠血清、肺组织匀浆液及BALF中/NF-α,IL-6水平。(5)细胞内信号传导系统中相关蛋白的检测:免疫印迹法(Western blotting)和免疫组织化学方法检测肺组织磷脂酰肌醇3-激酶(PI3-K),细胞外调节激酶(ERK)及磷酸化ERK(P-ERK)蛋白表达情况。【结果】 (1)油酸致伤后动脉血气、肺通透性改变:尾静脉注射油酸可以导致大鼠PaO_2和SaO_2降低,动脉血气表现为Ⅰ型呼吸衰竭;OG组左肺湿/千比、LI明显增加(P<0.05,P<0.05);BALF蛋白含量和PPI明显增加(P<0.01,P<0.05);BALF细胞数明显增加(P<0.05),增加的细胞以中性粒细胞为主。油酸组人体及显微病理表现主要为肺水肿、透……   
[关键词]:急性肺损伤;信号转导;凋亡
[文献类型]:博士论文
[文献出处]:中国人民解放军军医进修学院2005年