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缬氨酸生产菌的原生质体融合育种及发酵条件研究

张慧

  本文以代谢控制发酵理论为指导,重点研究了L-缬氨酸高产菌的选育及其发酵条件。主要研究内容和结果如下:(1)确定了黄色短杆菌TV826与黄色短杆菌TV1053原生质体融合的最佳条件,以黄色短杆菌(Brevibacterium flavum)TV1053和黄色短杆菌(B.flavum)TV826为亲株,采用原生质体融合技术,定向选育出了具有目的遗传标记的86株融合子,经过对这些融合子进行初筛和复筛,最终得到一株在摇瓶发酵条件下,L-缬氨酸产量达到26g/L的目的融合子TV02256。将目的融合子TV02256连续传代,结果表明该融合子TV02256的遗传是稳定的。(2)对选育获得的L-缬氨酸高产菌株进行摇瓶分批发酵试验,运用正交设计试验法和主成分分析法优化出最佳种子培养基和发酵培养基组成,并确定了最优发酵培养条件。在最优条件下,目的融合子TV02256摇瓶分批发酵L-缬氨酸产量达到39.4g/L。(3)以摇瓶分批发酵最优条件为基础,进行200吨发酵罐分批发酵放大试验,确定了最佳分批发酵工艺,6批次的L-缬氨酸平均产酸达43.8g/L,糖酸转化率平均为25.6%。……   
[关键词]:L-缬氨酸;黄色短杆菌;原生质体融合;发酵
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:天津科技大学2005年