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非洲菊再生体系的建立和遗传转化体系的探索

刘慧

  非洲菊为世界著名切花,花大、色艳、切花率高、水养期长,兼具色、形、韵之美,观赏价值极高,值得广泛种植。现在国内的非洲菊优良品种主要是通过从国外高价购进种子或种苗来获得,因此有必要利用各种育种方法培育我国自己的优良品种。本项目研究的目的就是针对非洲菊的育种方面的问题,研究非洲菊的高频再生体系及利用研究GUS基因的转化来探讨建立非洲菊的遗传转化体系,从而为优良品种的培育、改良和快速推广提供物质与技术支持。本实验主要利用优良的非洲菊品种的叶片作为材料,建立了非洲菊的高频再生体系,并在此基础上进行了农杆菌介导的GUS基因的转化,利用共培养后组织化学染色法分析探讨了影响转化效率的各种因素,初步优化遗传转化体系。主要结果如下:1 建立了非洲菊的再生体系。本实验得出愈伤组织的诱导是以MS为基本培养基,附加7mg/L2,4-D+0.1mg/L NAA,或者附加6mg/L BA+0.1mg/L NAA的效果为最佳,然后及时转接到MS+2mg/L BA+0.1mg/L NAA的培养基上诱导芽的分化。增殖培养是以MS+2mg/L1BA+0.1mg/LNAA和MS+3mg/LKT+0.1mg/L IBA交互使用为佳。生根培养是以1/2MS+0.1~0.2mg/LNAA的培养基为最佳。2 初步建立遗传转化体系。以GUS组织染色分析为依据初步建立了转化体系:用非洲菊的叶片和愈伤作侵染材料,预培养5d,在OD值为0.8的农杆菌液中侵染10min,共培养3d,此时GUS基因的瞬间表达率为最高,然后叶片转接到含400mg/LCarb和8mg/L的Hyp的MS培养基上;愈伤组织转接到含400mg/LCarb和6mg/L的Hyp的MS培养基上进行筛选培养。……   
[关键词]:非洲菊;再生;GUS基因;农杆菌;遗传转化
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:华中农业大学2004年