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核盘菌Ep-1PN菌株毒力衰退及生防潜能的研究

姜道宏

  本文对核盘菌Ep-1PN菌株的弱毒特性及其相关特性的遗传特点进行了分析,并评估了Ep-1PN菌株及其弱毒因子防治菌核病的生防潜能,现将结果报道如下:获得272株Ep-1PN的气生菌丝的原生质体再生菌株,并发现它们之中较高频率地出现了具有正常表型和部分正常表型的再生菌株,这表明Ep-1PN中的弱毒因子在不同细胞中分布是不均匀的。绝大多数Ep-1PN的有性后代(子囊孢子单孢分离物)的培养特性与核盘菌正常菌株的没有显著差异。因此Ep-1PN的毒力衰退不是由细胞核遗传物质变异所致,而是由胞质因子所致的。Ep-1PN的弱毒特性可以通过菌丝融合向正常菌株(营养体亲和性菌株)转移,使正常菌株表现出Ep-1PN的弱毒特性及其相关特性,表明在Ep-1PN中存在传染性胞质弱毒因子。在Ep-1PN中可以分离到3条dsRNA片段,大小分别约是7.4kb、6.4kb和1.0kb,而在正常菌株Ep-1PNA183中没有检测到任何dsRNA。Ep-1PNA183被Ep-1PN传染后,表现出Ep-1PN的特性,同时也可以自其中分离到3条类似于Ep-1PN的dsRNA片段,表明Ep-1PN中的dsRNA与弱毒特性紧密相关。其中7.4kb的dsRNA可能与弱毒特性没有直接的关系,而6.4kb和1.0kb dsRNA对寄主均有不同程度的影响,后者可能就是弱毒因子。Ep-1PN的单菌核分离物可不同程度地恢复生长和致病作用,来自Ep-1PN同一菌核的分离物中也有类似现象,这表明核盘菌有可能借助其休眠体——菌核摆脱弱毒因子的影响。在Ep-1PN中分离到2株能够抵御弱毒因子(dsRNA)作用的突变株,即SSB9和SA12~M,它们与Ep-1PN有很大的差异,并可在其中检测到1条7.4kb的dsRNA。Ep-1PN的弱毒特性及其弱毒因子(dsRNA)可以在土壤中或油菜叶面向正常的营养体亲和性菌株(Ep-1PNA183)中转移,使其发生毒力衰退,保护植株免遭毒力株的为害。而且Ep-1PN菌丝片段可以在油菜叶面上有效定殖7d以上。但Ep-1PN不能诱导寄主植物产生抗病作用,也不能通过营养竞争或位点竞争控制非亲和性毒力株的为害。采用双亲灭活法,对Ep-1PN和它的营养体非亲和性菌株Let-27的原生质体进行了融合,获得4株具有弱毒特性而且能够传染Let-27的目标融合子,并可在被目标融合子传染后的Let-27中检测到dsRNA。这表明Ep-1PN中的弱毒因子(dsRNA)可以在异源细胞核质中表达和发挥作用;原生质体融合介导可以克服营养体非亲和性的限制作用,拓宽Ep-1PN及其弱毒因子(dsRNA)的应用领域。……   
[关键词]:核盘菌;生物防治;弱毒性;真菌病毒;dsRNA;Ep-1PN
[文献类型]:博士论文
[文献出处]:华中农业大学1999年