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与大鼠受精相关的两种受体分子-GABA_BR和大鼠sp56的研究

何晓兵

  β-氨基丁酸(GABA)能够模仿并强化孕酮(progesterone)诱发哺乳类精子发生顶体反应(Acrosome Reaction, AR),说明哺乳类精子上存在有GABA样的受体。我们实验室以往的研究证明大鼠精子中确实表达了有功能的GABAAR,它负责介导了GABA和孕酮引发的顶体反应。本研究发现,在大鼠精子及睾丸中还表达了另外一种类型的GABA受体—GABABR。GABABR由GABABR1和GABABR2两种亚基才能形成有功能的受体。通过RT-PCR的方法,对GABABR在大鼠睾丸中的表达及其GABABR1的亚型进行了鉴定。结果显示,GABABR1及GABABR2在睾丸中均有表达;在睾丸中表达的GABABR1的剪切拼接体有GABABR1a、GABABR1c。GABABR1d在睾丸可能不表达;GABABR1b的表达与否还不能确定。Western Blot的结果显示,在大鼠睾丸组织和附睾尾精子中都有GABABR1a,GABABR1c/GABABR1b蛋白的表达,其分子量分别为130 KD 和100 KD;同时,GABABR2在大鼠睾丸和附睾尾精子也都有表达,但是GABABR2在成熟精子中的分子量比睾丸和大脑中的略大(~120 KD)。应用间接免疫荧光技术发现GABABR1和GABABR2都特异定位于大鼠精子的头部。睾丸中GABABR2的转录本与脑中的大小不同,缺失了后者3 非编码区最末端的2.2 Kb。GABA通过激活GABABR而负向调控了GABA或孕酮诱发的、由GABAAR介导的大鼠顶体反应。说明了GABA的两种受体在GABA或孕酮诱发的顶体反应的过程中存在着相互作用。这是哺乳类精子中第一次有关GABABR的组成和功能的研究报道。……   
[关键词]:大鼠睾丸;大鼠精子;β-氨基丁酸(GABA);GABAB受体;顶体反应
[文献类型]:博士论文
[文献出处]:中国科学院研究生院(上海生命科学研究院)2003年