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抗前列腺干细胞抗原单克隆抗体的制备

陶伟

  抗前列腺干细胞抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立目的:制备分泌抗前列腺干细胞抗原单克隆抗体的杂交瘤细胞株。方法:1)利用PC-3前列腺癌细胞作为抗原免疫BALB/c小鼠,取脾细胞和SP2/0骨髓瘤细胞融合,通过HAT培养基选择性培养,使目的细胞增殖并形成克隆;2)以PC-3细胞为抗原包板,行ELISA检测,筛选出阳性克隆;3)对阳性克隆进行单克隆化,证实杂交瘤细胞稳定分泌相应的单克隆抗体,予冻存,保种;4)小鼠腹腔注射杂交瘤细胞,大量生产单克隆抗体。结果:1)HAT选择性培养后,有176孔出现杂交瘤生长:2)ELISA检测,筛选出13个阳性孔;3)经过多次单克隆化,杂交瘤细胞稳定分泌单克隆抗体;4)小鼠腹腔注射杂交瘤细胞后,获得含大量单抗的腹水。结论:初步建立起一株分泌抗前列腺干细胞抗原单克隆抗体的杂交瘤细胞株。抗前列腺干细胞抗原单克隆抗体的鉴定目的:对单克隆抗体的特性进行鉴定,为应用提供理论依据。方法:亚类鉴定:抗小鼠IgG、IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3重链单抗作为分型抗体,运用双向免疫扩散法进行亚类鉴定;组织特异性分析:肿瘤及正常人体组织标本制成石蜡切片,细胞制成悬液涂在鱼型竺鲤堕燮迪丝鱼燮1一一一一一-中文摘要玻片上,95%酒精固定,进行免疫组化染色。结果:单克隆抗体和抗IgGI之间出现沉淀线;单抗和前列腺癌肿瘤呈阳性反应,与其他肿瘤组织均呈阴性反应,和人体正常组织无一出现阳性反应。结论:抗前列腺干细胞抗原单克隆抗体属于IgGI亚类,具有较高的前列腺组织特异性。……   
[关键词]:前列腺干细胞抗原(PSCA);前列腺癌(PCa);抗原;杂交瘤;单克隆抗体
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:苏州大学2003年