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新疆绵羊微卫星遗传分析及羊毛生长的神经内分泌调控

贾斌

  一.新疆绵羊微卫星遗传分析利用10个微卫星标记,采用PCR扩增,12%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、Sanguinetti银染法显色,对新疆北疆地区8个品种、1个杂交一代绵羊群体遗传多样性进行了检测,统计了各群体的等位基因组成、平均有效等位基因数(E)和平均基因纯合率,利用等位基因频率计算出各群体的平均遗传杂合度(h)、多态信息含量(PIC)和群体间的遗传距离,利用分子进化遗传分析软件(Molecular Evolutionary Genetics Analysis,MEGA),采用邻结法(Neighbor-joining method,NJ)重建系统发生树。同时根据等位基因频率,利用PHYLIP(3.6)分析软件,采用最大似然法(Maximum Likelihood,ML)构建系统发生树,应用自举检验(bootstrap test)估计系统树中结点的自引导值(bootstrap value),并进行了系统发生分析。结果表明10个微卫星位点在9个绵羊群体中的多态信息含量除BM1824、MAF65为低、中度多态外,其余8个微卫星均为高度多态,可作为有效的遗传标记用于各绵羊品种的遗传多样性和系统发生关系的分析;所有绵羊群体的平均PIC(0.5631)、h(0.5721)和E(2.9)均低于国外其他品种的绵羊,其基因多态性和遗传多样性相对贫乏;巴什拜羊和萨福克羊群体的近交程度较高,遗传多样性偏低。罗米丽羊的基因纯合率最低,其纯度不高。新疆本地土种阿勒泰羊、哈萨克羊和巴什拜羊与国外引进绵羊品种及混有外血的本地培育品种遗传距离较远,他们聚为不同的2类,各绵羊品种的分子系统发生关系与其来源、育成史及地理分布基本一致。二.羊毛生长的神经内分泌调控1、粗毛羊、细毛羊体重和羊毛生长及皮肤中生长激素受体(GHR)、胰岛素样生长因子1(IGF-1)和胰岛素样生长因子1型受体(IGF-1R)基因表达的发育性变化。为了探讨羊毛生长的神经内分泌调节机理,本研究以羊毛特征迥异的罗米丽(Romilly Hillys)×中国美利奴(新疆军垦型)杂交一代优质细毛羊和本地哈萨克粗毛羊作为实验动物,以18S rRNA作内标,采用相对定量RT-PCR方法,对30、60、90、135、180、255日龄两品种羔羊体重及羊毛生长以及30、90、135、255日龄皮肤中GHR、IGF-1和IGF-1R mRNA水平进行了比较研究,结果如下:(1)、体重增长和羊毛生长的规律:粗毛羊和细毛羊体重增长和羊毛生长的规律基本一致,即羔羊平均日增重随日龄增加而下降,羊毛平均日增长随日龄增加而升高。粗毛羊在30~90日龄平均日增重和羊毛平均日增长均显著高于细毛羊(P<0.01;P<0.01),90~255日龄平均日增重两品种无差异,而羊毛平均日增长在90~135日龄细毛羊高于粗毛羊(P<0.01),135~255日龄无差异。两品种内平均日增重无性别差异。贾斌新棍绵羊徽卫星遗传分析及羊毛生长的神经内分泌调控而羊毛平均日增长,粗毛羊在90一180日龄雄性显著高于雌性,细毛羊60一90日龄雄性显著高于雌性。(2)、皮肤中GHR、IGF一1和IGF一IR基因表达的发育性变化:粗毛羊和细毛羊皮肤中GHR、IGF一1和IGF一IR基因表达都呈现明显的发育性变化,粗毛羊和细毛羊之间皮肤中GHR、IGF一1和IGF一IR基因表达的发育性变化模式基本一致.(1) GHRmRNA相对丰度,粗毛羊在30一90日龄逐渐升高,在90日龄出现一个高峰(P<0 .05),随后T降,到255日龄时达显著水平(P<0.05);细毛羊30一90、90一135日龄逐渐升高(P<0.01,P<0.01),在135日龄出现高峰,然后显著下降(P<0.01).两品种内均无性别差异.(2)IGF一1 mRNA相对丰度,粗毛羊在30一90日龄维持较高水平,135~255日龄逐渐下降(P<0.01);细毛羊随日龄增加逐渐下降,255日龄达显著水平(P<0 .05).在90和135日龄雌性显著高于雄性.(3)IGF一IR mRNA相对丰度,粗毛羊在30一90日龄显著升高(P<0.05),90日龄出现高峰,之后显著下降(P<0 .01);细毛羊随日龄增加而缓慢下降(P>0 .05),无发育性变化.两品种内均无性别差异.2、半脱胺对羔羊增重、羊毛生长及皮肤中GHR、IGF一l和IGF一IR基因表达的影响试验选用214只罗米丽(Romiliy Hillys)‘中国美利奴(新疆军垦型)杂交一代断奶母羔,随机分成试验组和对照组,试验组日粮中添加700ppm半耽胺盐酸盐饲料添加剂(CT加oo),实验期为120天,试验前和试验结束时称重、采羊毛和皮肤样品一测定羊毛长度、细度、强度、弯曲度和羊毛油汗颜色,并用反转录多聚酶链式反应(RT-PcR)方法,以1 85 rRNA作内标,半定量分析绵羊皮肤中生长激素受体(G HR)、胰岛素样生长因子1(I GF一1)和胰岛素样生长因子1型受体(I GF一IR) mRNA的相对丰度.结果如下:(1).与对照组相比,半脱胺处理使羔羊平均日增重提高12.77%(P<0.0l),羊毛平均日增长提高24.01%(P<0 .01),羊毛纤维直径平均日增长提高217.31%(P<0 .01),羊毛纤维强度没有显著的差异(P>0 .05),并能显著改善羊毛油汗颜色和羊毛弯曲度(P<0 .05).(2).试验组皮肤中GHR mRNA表达比对照组高1 1 0 .57%伊<0.01),IGF一lmRNA表达比对照组高29.50%(P>0.05),IGF一IR mRNA表达比对照组高38.12%(P>0.05)。结果表明,半脱胺能够显著提高羔羊生长性能,促进羊毛生长,显著上调皮肤中……   
[关键词]:绵羊;羊毛;皮肤;微卫星;GHR;IGF-1;IGF-1R;相对定量RT-PCR;遗传多样性
[文献类型]:博士论文
[文献出处]:南京农业大学2003年