手机知网 App
24小时专家级知识服务
打 开
手机知网|搜索

当归芍药散对拟血管性痴呆小鼠氧化损伤治疗作用机理的实验研究

武常生

  目的:血管性痴呆(Vascular Dementia ,VD)属中医学老年呆病范畴。近年来,随着社会人口老龄化,VD的患病率越来越高,成为严重影响人们生活质量的重要因素。因此,深入探讨VD的病理机制,开发和研制防治VD的有效药物具有非常重要的意义。本研究通过观察当归芍药散对拟血管性痴呆小鼠脑组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)等指标的影响,从抗氧化损伤角度探讨其对VD的治疗作用机理,为临床治疗血管性痴呆提供实验依据。方法:实验采用双侧颈总动脉结扎的方法制备血管性痴呆小鼠模型。昆明小鼠360只,随机分为假手术组(sham-operation group,S)、模型组(model group,M)、当归芍药散高剂量组(high-dose DanguiShaoyaoSan group,H)、当归芍药散低剂量组(low-dose DanguiShaoyaoSan group,L)、银杏叶提取物对照组(Extract of GinkgoBiloba control group,E)、尼莫地平对照组(Nimodipine control group,N)6组,每组60只。S组小鼠只分离颈总动脉,穿线但不结扎,尾部不放血,其余M、H、L、E、N各组结扎双侧颈总动脉阻断血流加尾部放血,制备反复脑缺血再灌注VD模型。术后第2天开始治疗。H组和L组灌服当归芍药散水煎剂(以下简称“归芍煎”),E组灌服银杏叶提取物混悬液银杏叶液(以下简称“银杏叶液”),N组灌服尼莫地平混悬液(以下简称“尼莫地平液”),S、M两组均灌服生理盐水。分别于术后7、15、30天进行行为学实验(跳台法、水迷宫法)。行为学实验结束后断头处死小鼠,取左侧脑组织固定后切片,常规HE染色和硫堇染色,光镜下观察脑组织的形态变化;取右侧脑组织制成10%的脑组织匀浆,采用黄嘌呤氧化酶法测定脑组织SOD活力、硫代巴比妥酸比色分析法测定脑组织MDA含量、比色分析法测定脑组织GSH含量和GSH-Px活力。通过与银杏叶提取物和尼莫地平对照,观察高、低剂量当归芍药散对拟VD小鼠脑组织 MDA、GSH含量及SOD、GSH-Px活力的影响。结果:1当归芍药散对拟VD小鼠行为学实验的影响1.1水迷宫成绩术后7天、15天和30天,小鼠的学习成绩与记忆成绩改变基本一致, M组小鼠的游全程时间延长,错误次数增加,与S组比较差异具有显著性统计学意义(P<0.05或P<0.01)。H、L、E、N各组与M组比较,差异有显著性统计学意义(P<0.05或P<0.01)。H组与L、E、N各组比较,术后7天无显著性统计学意义(P>0.05),15天和30天时有显著性统计学意义(P<0.05或P<0.01);L、E、N各组之间比较无显著性统计学意义(P>0.05)。1.2跳台成绩术后各时段, M组小鼠的反应时间延长,潜伏期缩短,错误次数增加,与S组比较,有显著性统计学意义(P<0.01)。H组与M组比较,反应时间缩短,潜伏期延长,错误次数减少,差异有显著性统计学意义(P<0.05);H组与L、E、N各组比较,术后7天学习成绩无显著性统计学意义(P>0.05),术后15天和30天的学习成绩和各时段的记忆成绩均有显著性统计学意义(P<0.05或P<0.01);而L、E、N各组之间比较无显著性统计学意义(P>0.05)。2当归芍药散对拟VD小鼠病理形态学的影响光镜下病理形态学显示,术后M组小鼠脑组织海马区呈缺血性病理改变。锥体细胞层次减少,排列稀疏,明显脱失,胞浆内尼氏体消失,细胞核体积变小,结构不清。随着时间的推移,模型小鼠脑组织病理改变逐步加重。各用药组小鼠病变轻于M组。3当归芍药散对VD小鼠脑组织MDA 、GSH含量及SOD、GSH-Px活性的影响3.1当归芍药散对VD小鼠脑组织MDA的影响各时段M组小鼠脑组织MDA含量(7天、15天、30天分别为9.12±3.31、9.28±2.08、9.14±2.71)较S组(3.65±2.31、3.48±1.22、3.42±1.56)明显升高(P<0.01);经用药干预后,各时段各用药组小鼠脑组织MDA含量均低于M组(P<0.05或P<0.01);各治疗组比较,术后7天各治疗组(H、L、E、N各组分别为4.88±1.19、6.00±2.16,6.38±2.38、6.29±2.38)之间差异无显著性统计学意义(P>0.05);术后15天和30天H组小鼠脑组织MDA含量(4.10±1.55、3.45±1.12)低于L组(5.94±2.02、5.56±1.70)、E组(6.35±2.03、5.76±2.15)和N组(6.12±2.27、5.96±1.50)(P<0.05);L组、E组和N组之间比较无显著性统计学意义(P>0.05)。3.2当归芍药散对VD小鼠脑组织SOD活性的影响各时段M组小鼠脑组织SOD活性(15.07±4.14、14.05±5.05、15.72±5.93)均较S组(32.78±7.70、32.45±10.01、35.60±9.80)明显降低(P<0.01);经用药干预后,用药各组小鼠脑组织SOD活性(H组:28.06±6.75、32.15±10.25、37.14±6.75;E组:20.79±5.89、23.02±9.82、27.33±11.53;N组:20.33±6.00、23.56±10.19、25.84±8.88;L组:22.82±5.97、25.01±8.93、28.52±9.03)均较M组升高(P<0.05或P<0.01);用药各组之间比较,各时段H组小鼠脑组织SOD活性均较E、N组升高(P<0.05或P<0.01),H组与L组比较,术后7天和15天,两组无显著性统计学意义(P >0.05),术后30天,H组高于L组(P <0.05)。L、E、N各组间比较,各时段均无显著性统计学意义(P……   
[关键词]:当归芍药散;血管性痴呆;氧化损伤;病理形态学;实验研究
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:河北医科大学2003年