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1998~2002年间河南省H_9N_2亚型AIV的抗原性漂变研究

刘岩

  为了探讨H_9N_2亚型禽流感病毒的抗原性有否发生漂移,本研究从生物学角度和HA基因分子水平上对1998—2002年间在河南省豫北地区分离到的5株H_9N_2亚型禽流感病毒的抗原性变化进行了比较和分析。经HI试验、鸡胚中和试验、细胞中和试验、攻毒保护试验,结果显示:98-02年河南豫北地区流行的H_9N_2亚型不同毒株间已经发生了抗原性的漂移。1998年和1999年H_9N_2亚型禽流感病毒较稳定,98A5和99S毒株间的保护力接近100%,在HI、鸡胚中和、细胞中和试验结果的相关性均在0.74以上,表明两毒株间的抗原性相近。2000年以后,毒株变化加大;用00Y攻1998年—2002年的疫苗,均不能100%的保护,仅为60%-80%;02Y株对00Y外的1998年—2002年的疫苗攻毒,免疫保护率的大小与年代呈负相关性,依次为3/5、3/4、4/5、5/5,HI、鸡胚中和、细胞中和试验也取得类似结果。通过RT—PCR方法和核苷酸序列测定获得了5个毒株的HA_1基因的(560bp-1046bp)片断,比较内部核苷酸发现:99S与98A5相比变化不大(相差1~4个位点)而00Y、01Q、02Y分别发生了8、5、6个位点的变化,其中00Y上895bp位的核苷酸突变为A,引起糖基化位点的氨基酸改变为NTT;02Y突变位点多集中在HA_1的近羧基端(924bp、948bp、973bp、1000bp),这些可能与抗原性的漂移有关。五株病毒的HA裂解位点均为PARSSR↓GLF,是典型的低致病性毒株;构成受体结合位点的191位氨基酸为His(H),国内其它毒株都为Asn(N)。五株病毒间的核苷酸与推导的氨基酸序列同源性分别为97.2%—98.7%和96.2%—99.2%;基因进化分析表明:本试验5株病毒与香港G_9/97处在欧亚谱系的同一支系上,而与香港G_1/97处在不同支系上;以 98A5和 995的进化同源性最高,00Y与四株病毒的遗传距离最大。本研究结果表明:1998年一2002年我省豫北地区鸡群中比几亚型禽流感病毒己发生了抗原性漂变,该研究结果从理论上为我国政府制定禽流感扑灭政策、有效地防制HJ。流行提供科学的指导,为生产上H抓。亚型流感免疫与制苗毒株的选择提供参考依据。……   
[关键词]:AIV;H_9N_2亚型;HI;中和试验;攻毒保护试验;RT-PCR;HA基因;漂移;裂解位点;同源性
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:河南农业大学2003年