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大葱病毒病原鉴定及脱毒苗培养·增殖·农艺性状的研究

黄晓梅

  种传病毒的种类日趋增多,病毒病危害加剧,导致作物产量和品质大幅下降。大葱病毒病普遍发生,危害严重。本试验以大葱为试材,探讨有性繁殖植物种传病毒的脱毒种苗速繁途径,建立良繁体系,为种传病毒植物工厂化生产无毒种苗提供科学理论依据和关键技术。本试验在对黑龙江省大葱病毒病原和种子带毒初步鉴定的基础上,以茎尖为外植体,进行脱毒苗培养与增殖,及脱毒种子大葱农艺性状的研究,结论如下:1 黑龙江省大葱病毒病发生普遍,是导致产量和品质下降的主要原因。根据大葱病毒的寄主范围、病毒粒体形态、病理超微结构等测定结果,初步鉴定侵染大葱病毒病原属于马铃薯Y病毒科(Potyviridae),是马铃薯Y病毒属(Potyvirus)的暂定成员,其种子可传带病毒。大葱感染病毒后,叶肉细胞质内产生风轮状和束状内含体,叶绿体和细胞核等细胞器遭受严重破坏。2 茎尖分生组织启动培养的最佳培养基为MS+NAA0.1mg/l+2iP0.4mg/l,诱芽率100%,茎粗0.202cm;根系诱导的最佳培养基为1/2MS+NAA0.01mg/l+IBA1.5mg/l,生根率及驯化成活率均达100%;病株假茎经75℃高温处理10min后,剥取0.3~0.5mm茎尖培养,成活率达98.3%;病症观察和电镜检测结果表明脱毒率达100%;茎尖分生组织直接分化丛生苗的最佳培养基为MS+NAA0.1mg/l+2iP0.6mg/l,通过25天继代一次的途径实现丛生苗分化,茎尖分生组织平均分化6.8株苗,丛生率达100%;茎盘诱导愈伤组织形成的最佳培养基为MS+KT0.5mg/l+2,4-D1.5mg/l,愈伤组织诱导率达97.5%,愈伤组织重量增加14.54倍。愈伤组织分化再生植株的最佳培养基为MS+ NAA0.2 mg/l+2iP0.6 mg/l,分化率达91.7%,平均每块分化10.62株苗;茎尖分生组织培养苗和茎尖分生组织丛生苗未发生染色体数目变异,染色体数均为2n=16;愈伤组织及再生苗遗传稳定性较差;快繁技术途径三条:(1)由茎尖外植体直接诱导成苗;(2)由茎尖外植体直接分化丛生苗;(3)由茎盘诱导产生愈伤组织,再由愈伤组织诱导再生植株。最后用试管苗进行种子扩繁。3 脱毒种子大葱比未脱毒种子大葱外渗电导率低,叶绿体含量高,根系活力强,根系吸收面积大。脱毒种子大葱在株高、叶片数、假茎长度、假茎茎粗、最大叶片长度、单株重量和产量上均优于未脱毒种子大葱,前者比后者增产30%以上;脱毒种子大葱在Vc、蛋白质、可溶性糖、干物质重、可溶性固形物、挥发性硫化物含量等均与未脱毒种子大葱差异显著,前者比后者分别提高3.7%、3.47%、15.05%、9.51%、5.1%、43.24%;纤维素含量则降低9.82%。……   
[关键词]:大葱;病毒病原鉴定;脱毒苗;农艺性状
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:东北农业大学2003年