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可溶性HLA-Ⅰ的检测及其对肾移植排斥反应的动态监控和其它临床意义

吴涛

  目的:1.探讨ELISA双抗夹心法检测可溶性HLA-Ⅰ的最佳实验条件,稳定实验方法:2.将可溶性HLA-Ⅰ定量检测技术用于检测广东人的正常值;3.采用ELISA双抗夹心法检测成分血中可溶性HLA-Ⅰ的含量:4.采用ELISA双抗夹心法对肾移植术后可溶性HLA-Ⅰ的含量进行动态监测。方法:以W6/32包被酶标板,捕捉样品中可溶性HLA-Ⅰ,加入一抗β2m抗体,再加酶标二抗及底物显色。根据可溶性HLA-Ⅰ的不同浓度标准品显色后的OD值绘制标准曲线:1.检测60例正常广东人血清中可溶性HLA-Ⅰ的含量;2.检测20例献血员成分血中可溶性HLA-Ⅰ的含量;3.动态检测10例肾移植患者术后血清中可溶性HLA-Ⅰ的含量。结果:1.采用本技术,可溶性HLA-Ⅰ最低检测限为2.84ng/ml,批内变异系数为5.80%,批间变异系数为9.00%,回收率为(98.57-100.15)%。广东人可溶性HLA-Ⅰ正常值为(699.54±360.10)ng/ml;2.贮存28天的RBC和随机供者血小板的可溶性HLA-Ⅰ的的浓度明显高于其它成分血,并且与成分血中残存的白细胞数和贮存时间有关;3.肾移植患者的sHLA-Ⅰ水平在临床出现急性排斥前1~3天显著增高,应用免疫抑制剂冲击有效时可溶性HLA-Ⅰ下降;未发生排斥反应者则无明显波动。结论:1.巩乃A法检测可溶性比卜工灵敏、特异、稳定;2.在临床输血过程中可考虑选择性输注含有不同浓度可溶性HLA-I 的成分血:3.动态监测可溶性HLA-I能预示肾移植排斥的发生,对治疗效果的判断也有一定价值。……   
[关键词]:可溶性人类白细胞抗原-I类(sHLA-I);酶联免疫吸附试验(ELISA);成分血;肾移植;急性排斥反应
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:第一军医大学2002年
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