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生物染色素与生物大分子受体体外作用的光散射表征及其分析应用

李原芳

  生物染色素广泛存在于自然界和生物体内,参与诸如光合作用和生命物质的运输等生物物理过程,因此研究生物染色素与生物大分子物质的作用过程具有十分重要的意义。本文选择了具有抗菌特点的生物染色素作为分子识别的主体,应用共振光散射(RLS)技术、光电子吸收光谱对有关反应机理进行探讨,并建立简单、快速、灵敏地测定核酸和蛋白质的光散射分析方法。天青A、天青B、健那绿B等都是醌亚胺类生物染色素,在适当的酸度和离子强度下,它们与微量核酸作用产生明显的共振光散射增强信号。利用增强的共振光散射强度在一定范围内与核酸的浓度成良好的线性关系,建立了检测限均在10.0ng/mL以下的核酸分析法,并对有关作用机理作了初步探讨。在中性条件下,阿利新蓝8GX(ABGX)与DNA作用产生以398.8nm,451.1nm,469.0nm为特征峰的共振光散射(RLS)增强光谱。根据RLS的测定和吸收测定建立了ABGX与DNA之间作用的静电吸引机理,并根据最佳条件下,398.8m处的共振光散射增强与ctDNA和fsDNA的浓度在0~2.0μg/ml范围内成线性关系建立了检测限在纳克级的DNA分析方法。酸性品红和固绿FCF是阴离子三苯甲烷类生物染色素。在酸性条件下,它们的RLS信号能被蛋白质增强,最大散射峰位于277.0和279.0nm,且增强RLS强度在一定范围内与蛋白质浓度有线性关系,其中固绿FCF是目前RLS法测定蛋白质最灵敏的方法,检测限为0.6ng/ml。方法用于人尿中蛋白质的测定,结果满意。在中性溶液中,阿利新蓝SGX与蛋白质作用产生增强的RLS信号,根据398刀urn处增强的RLS强度,使用不同浓度的阿利新蓝能测定0-3.5 pg/ffil范围内的蛋白质,检测限低于30.0 hl.合成样的测定结果重现性好,此方法用于人血清样品测定,结果与使用CBB G-250 Bradford方法一致.……   
[关键词]:共振光散射;JGB;RLS;核酸分析;光散射分析;DNA;染色素;生物大分子;体外作用;分析应用
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:西南师范大学2002年