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树莓叶片离体再生及植酸酶基因转化的研究

安伟

  本实验以树莓6个栽培品种为试材,用叶片作为外植体进行离体培养,建立了树莓无性系B的高频、稳定、快速的离体再生体系。通过实验发现基因型是影响树莓叶片离体再生的主要限制因子。在供试的6个品种中,无性系B的再生能力最强。在合适的培养基中其再生频率可达90%以上,平均每叶片的再生芽数可达12.0个。外源激素的种类、浓度及配比是影响树莓叶片离体再生的重要因素。在实验中激素配比BA2.0mg/L+IBA 0.1mg/L可获得最高的再生频率和最高的叶片再生芽数。实验中还发现21-30天苗龄的叶片的再生能力最强。MS培养基在供试培养基中是最适合树莓叶片离体再生的基本培养基。持续黑暗和较强的光照(3000Lux)均不利于树莓叶片的离体再生。本研究采用叶盘法对树莓品种B、烟草品种A进行了植酸酶基因的遗传转化,并在筛选培养基中获得再生芽,对其中部分烟草的转化芽进行了PCR检测为阳性,说明植酸酶基因已整合到烟草植物基因组中。但对树莓的再生芽进行PCR检测却为阴性,本文分析了未成功进行转化的几点原因,为今后树莓转基因研究奠定了基础。……   
[关键词]:;;叶片再生;遗传转化
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:吉林农业大学2002年