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农杆菌介导的几丁质酶基因及双价抗虫基因对小麦和棉花遗传转化的研究

高燕会

  小麦和棉花分别是世界上重要的粮食和经济作物,其产量和品质受到病虫害的严重影响,因此,加速培育抗病虫的优良小麦和棉花品种是农业生产的重要课题之一。本研究通过农杆菌介导法将几丁质酶基因和几丁质酶+蝎毒素双价抗虫基因导入小麦和棉花并对其进行遗传转化研究,从基因型、愈伤组织的不同形态、愈伤组织的继代次数、抗菌素浓度的选择及AS添加与否等影响小麦和棉花转化效率的因素和条件进行了较为系统的探讨,结果表明:小麦幼胚的出愈率和植株的再生均受到基因型的影响,本实验所用的10个小麦品种中99G23的出愈率和再生率最高(99.5%和87.5%);短期继代的呈乳白色、淡黄色、新鲜、易碎、生长旺盛的小麦胚性愈伤组织的分化能力强(91.7%),植株的再生率高(75%);AS是影响小麦遗传转化的因素之一,YEB培养基(菌液)和共培养培养基中均加入AS 50mg/L时诱导的抗Km的愈伤组织的百分率最高(84.4%);经25~50mg/L Km筛选得到的36株抗性植株,其分子检测正在进行之中。棉花的基因型对于抗性愈伤组织的诱导频率影响不大,而外植体下胚轴的转化率(45~47%)明显高于叶柄的转化率(30~34%);转化过程中Hyg的浓度为5~10mg/L时有利于抗性愈伤组织的诱导,AS对于棉花的转化效率无影响;抗性植株和愈伤组织的分子鉴定正在进行中。本研究所建立的小麦和棉花优化的农杆菌介导转化技术体系,可为小麦和棉花等作物遗传转化提供参考。……   
[关键词]:小麦;棉花;几丁质酶基因;蝎毒素基因;农杆菌介导法
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:山西农业大学2001年