手机知网 App
24小时专家级知识服务
打 开
手机知网|搜索

扇贝多肽对HeLa上皮细胞和小鼠皮肤紫外线UVA氧化损伤的保护作用研究

姚如永

  摘 要目的 采用海洋生物工程技术,自栉孔扇贝中提取扇贝多肽(PCF),分子量为800-1000。建立紫外线UVA(辐照强度细胞为3650uJ/cm2、动物为151.68J/cm2)对HeLa上皮细胞和昆明种无毛小鼠氧化损伤模型。探究PCF对HeLa上皮细胞和无毛小鼠皮肤紫外线UVA氧化损伤的保护作用。方法HeLa上皮细胞实验设计分为6组,RPMI1640未损伤组、模型组(RPMI1640照射组、0.5%PCF组、1% PCF组、2% PCF组、1%维生素C组)。MTT法测定细胞活性;酶法测定抗氧化酶(GSH-Px、CAT、SOD)活性和MDA的含量;流式细胞仪Annexin V法测定细胞的凋亡率和死亡率;以Fluo-3 AM为荧光染料,流式细胞仪测定细胞内游离Ca2+的含量。昆明种无毛小鼠,随机分为双蒸水未照射组和模型组(双蒸水照射组、5%PCF组、20% PCF组、10%维生素C组)。HE染色法计数皮肤成纤维细胞;酶法测定皮肤匀浆抗氧化酶(GSH-Px、T-AOC、SOD)活性和MDA的含量;免疫组织化学法测定皮肤Bcl-2和NOS基因表达;电镜观察皮肤组织超微结构。 结果 结果表明,PCF能明显增加Hela上皮细胞的OD值和细胞内游离Ca2+的浓度。显著提高Hela上皮细胞和皮肤组织匀浆总抗氧化能力及GSH-Px、CAT、SOD活性,降低MDA含量,且呈量效关系。同时亦降低Hela上皮细胞的凋亡率和死亡率。组化和免疫组化结果表明,PCF能增加皮肤成纤维细胞的数量;上调Bcl-2基因的表达;抑制NOS的表达。超微结构显示PCF组表皮细胞结构正常,成纤维细胞的细胞器结构正常;模型对照组表皮细胞损伤,胞质内可见空泡形成,真皮成纤维细胞内可见囊泡状扩张的滑面内质网,粗面内质网等细胞器减少,PCF组与模型对照组比较各项指标均有统计学意义(P<0.05)。 结论扇贝多肽具有抗紫外线UVA对Hela上皮细胞和无毛小皮肤氧化损伤的作用。其机制与扇贝多肽上调Bcl-2基因表达,下调NOS基因的表达,提高抗氧化酶含量,抑制脂质过氧化有关。……   
[关键词]:扇贝多肽 紫外线UVA 抗氧化剂 自由基
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:青岛大学2001年