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秸杆固态发酵酒精高产菌株的选育

董秀芹

  本论文对秸杆固态发酵高产菌株进行了研究,包括霉菌的选育和酵母菌的选育两大部分。霉菌的出发菌株为康氏木霉TR,对其产酶的最优条件进行探索,结果表明产酶最适条件为132h、葡萄糖浓度0.5%、料水比1:1.1、最适温度30℃,此时CMC酶活为78.6IU/g曲,βG酶活21.0IU/g曲,FPA酶活33.6IU/g曲。康氏木霉经过紫外线诱变,结合双层平板分离技术选育,纤维素酶产量明显提高,CMC酶活从最初的78.6IU/g曲提高到235.17IU/g曲,βG酶活从21.0IU/g曲提高到91.60IU/g曲,FPA酶活从33.6IU/g曲达119.56IU/g曲。经过数代活化测定后,它们遗传性状稳定,可以作为进一步诱变的出发菌株。酵母的出发菌株为1#、2#、3#、4#,其中1#和3#产酒精能力较高,分别为6.978%和6.823%,而2#和4#发酵力较差,但它们耐高温能力好,实验中采用PEG和电场诱导两种原生质体融合技术,获得五株稳定的融合子F2、F5、F7、F14、F20。对这五株融合子的倍性、生物学特性、遗传稳定性及死灭温度和发酵力的测定结果表明,它们均为单核稳定的融合子。以发酵培养基测定,F5、F7、F14、F20在38℃比1#菌株在30℃的发酵力相同或偏高。通过多次融合试验发现,PEG诱导融合效率最高为3.1×10~(-6),而电场诱导融合效率达5.64×10~(-4)(条件是脉冲强度为11KV,脉冲宽度为10μS,脉冲间隔为10S,脉冲次数为3),但二者融合结果无明显的区别。……   
[关键词]:康氏木霉;酵母;诱变;融合;纤维素酶;发酵力
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:中国农业大学2001年