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SIRS-肺损伤大鼠模型与抗炎因子表达及AP-1活性变化的研究

李琦

  本研究采用内毒素(lipopolysaccharide,LPS)和油酸(oleic acid,OA)致伤Wistar大鼠,建立了梯级剂量LPS一次性致伤和OA+LPS序贯性两次致伤的大鼠SIRS-肺损伤动物模型;在此动物模型基础上,采用ELISA法检测了血浆IL-4、IL-10和IL-13含量;采用RT-PCR法检测了肺组织IL-4、IL-10和IL-13的mRNA含量;采用EMSA法检测了肺组织AP-1活性;同时,采用ELISA法检测了临床ARDS、SIRS病例的血浆IL-4、IL-10和IL-13含量。探讨:①建立大鼠SIRS-肺损伤动物模型的方法;②SIRS-肺损伤的发生、发展与IL-4、IL-10和IL-13表达,及转录调控因子AP-1活性变化的关系;③临床ARDS、SIRS的抗炎机制变化。结果:①LPS致伤以后,大鼠的PaO_2、外周血白细胞计数与分类大白细胞构成比、肺水含量以及病理学检查均有显著异常;LPS≥6mg/kg时,大鼠PaO_2早期低于8kPa,外周血白细胞计数2h以后显著降低,分类大白细胞构成比显著升高,肺水含量显著增加,病理学改变显著加重;②OA+LPS两次致伤,大鼠PaO_2显著降低,外周血白细胞计数和分类大白细胞构成比显著升高,肺水含量显著增加,且以间隔4h的两次致伤方式导致的上述变化最大;③梯级剂量LPS致伤,大鼠血浆IL-4、10、13含量和肺组织IL-4、10、13 mRNA含量显著升高,肺组织AP-1活性升高;LPS≥6mg/kg时,血浆IL-4、10、13含量高峰值由4h点提前到2h点,血浆IL-4、10、13含量、肺组织IL-4、10、13mRNA含量和AP-1活性的高峰值水平均非常显著升高,高峰以后仍然保持在高水平;④OA+LPS两次致伤后,大鼠血浆几叶、10、13含量、肺组织几叶、10、13mRNA含量和AP1活性均显著高于OA致伤,尤其以两次致伤间隔4h的方式引起的上述指标峰值升高最大:⑤AmS和SIRS患者的血浆ILA、10、13均显著升高:而且,*RD S组显著高于SI*S组。结论:①梯级剂量LPS致伤大鼠,可以模拟严重感染引起的SIRS用损伤发生,以及发展成为失控性 SIRS明损伤/ARDS的过程;LPS 36mg/kg导致严重的肺损伤,相当于SIRS硝损伤失控,发生ARDS的表现。②OA+LPS两次致伤大鼠,可以模拟创伤后继发感染引起全身炎症反应放大,发生失控性SIRS明损伤/ARDS的过程;两次致伤间隔4h方式导致SIRS月损伤失控,发生AmS,肺损伤最重。③LPS 6mg&g是大鼠 S征S.肺损伤失控,发生AapS的临界剂量;OA+LPS两次致伤,第一次致伤后4h点是第二次致伤引发大鼠SIRS小损伤失控的“敏感期\④抗炎因子IL** * 表达异常增强,参与了SIRS刁损伤的发生和发展,与SIRS失控形成AmS有密切关系。⑤SIRS明损伤大鼠模型的几一、10、13基因表达异常,血浆几*、10、13含量升高与肺组织IL4、10、13mRNA表达升高有关;与其肺组织中的转录调控因素AP.1 活性升高有关。⑤临床ARDS和SIRS患者的血浆IL4、10、13含量升高,且ARDS的升高幅度显著高于SIRS,证实了抗炎机制增强,抗炎性细胞因子大量产生、释放,是SIRS明损伤发生、发展和ARDS )its3t的重要机制的一部分。……