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DNA指纹图、微卫星DNA在近交系大鼠遗传监测中的应用研究

李瑞生

  本实验应用DNA指纹图法和微卫星DNA法对国内已知的6个品系8个近交系大鼠群体(SHR京、SHR/sp京、LEW京、RCS京、WKY京、F334京、SHR哈、WKY哈)进行了DNA多态性分析,并与目前常规应用的生化标记分析法进行了比较。结果表明:(1)不同品系间DNA指纹图带相差较大,其平均图带数为16.360±2.178,共有带率为0.062±0.009,相似系数为0.063±0.009,相同DNA指纹图概率为3.692×10~(-23)。同一群体不同个体之间差别较小,其相似系数除SHR(哈)为0.667±0.333和WKY(哈)为0.645±0.355外,其余均大于0.947;共有带率除SHR(哈)为0.670±0.330和WKY(哈)为0.648±0.352外,其余均大于0.967。不同地区同一SHR品系间及不同地区同一WKY品系间DNA指纹图带也存在一定差别,其相似系数分别为0.542±0.013和0.351±0.044,共有带率分别为0.543±0.013和0.354±0.044,相同DNA指纹图概率分别为1.038×10~(-4)和4.777×10~(-7)。(2)对6种(SHR京、SHP/sp京、WKY京、F334京、LEW京、RCS京)不同品系近交系大鼠相同DNA进行了4次DNA指纹图谱制作分析,其平均图带数、相似系数和共有带率基本一致,经T检验(P>0.05)。(3)近交系RCS(京)和WKY(京)大鼠杂交子代的DNA指纹图带分别来自父母代,谱带在亲代与子代间的传递符合孟德尔遗传规律;同一个体(LEW京)不同组织(脑组织、肝组织、肌肉和血液)的DNA指纹图谱完全一致。(4)在近交系大鼠1,3,7,8,11,14,19号染色体上的10个位点选取10对引物,对6个品系8个近交系大鼠群体进行了PCR扩增微卫星DNA多态性检测分析,其不同个体每个位点均呈现一条清晰图带;不同品系个体之间具有显著多态性;同一群体不同个体之间除SHR(哈)的SMST位点和WKY(哈)的AGT位点出现一定的差异外,其它个体之间均没有差异;不同地区同一品系之间也存在一定差别。对6个品系8个近交系大鼠群体的10个微卫星位点相似系数统计分析,其中SHR(京)与SHR/sp(京)、SHR(哈)和F344之间以及SHR(哈)与WKY(哈)之间的相似系数较高为F=0.7~0.8,而WKY与LEW和F344之间以及LEW和RCS之间的相似系较低为F=0.1。(5)对6个品系8个近交系大鼠群体的9个位点进行生化标记分析,除2个群体SHR(哈)和WKY(哈)在Es-3位点出现可疑带外,其余结果均与国标判定标准一致。对来自北京SHR与SHR/sp之间9个位点进行比较,其9个位点完全相同。不同地区同一WKY在Es-10位点存在差异。从而证实了DNA指纹图和PCR扩增微卫星DNA法比生化标记法更准确、更可靠,并能更精确地反映出动物个体间的变异程度和遗传距离。……   
[关键词]:DNA指纹图;微卫星DNA;近交系大鼠;遗传监测
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:中国人民解放军军需大学2001年