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法氏囊活性肽的制备与应用

侯艳红

  采用两种方法制备法氏囊活性肽,其一是根据囊素的化学结构用固相法人工合成,经高压液相色谱(HPLC)、毛细管电泳(CE)及氨基酸分析等方法鉴定,纯度可达94%以上;其二是利用超滤技术从法氏囊组织中直接提取,经薄层层析(TLC)及高压液相色谱鉴定,表明超滤液中含有囊索三肽。结合薄层扫描仪,通过峰面积,求得超滤液中囊素三肽的含量为2.871mg/ml.。从高压液相色谱图中算出囊素的含量为2.399mg/ml。用超滤技术制备纯化的法氏囊活性肽,以不同的剂量肌肉注射21日龄SPF鸡,同时颈部皮下接种IBD胚毒或细胞毒灭活油苗,结果表明:法氏囊活性肽能够缩短IBD油苗所诱导产生抗体的时间,提高抗体水平,高剂量(0.8ml)法氏囊活性肽油苗组比免疫对照组平均高1—2个滴度;将不同剂量的法氏囊活性肽冻干粉与IBD活苗混合,对21日SPF鸡龄滴鼻点眼,发现纯化的法氏囊活性肽能够加快IBD活苗诱导产生抗体的速度,提高抗体滴度,能够拮抗IBD活苗对法氏囊的损伤,并促进法氏囊的修复,其中,中剂量(0.4ml)法氏囊活性肽活苗组比免疫对照组平均高2个滴度;将用同样方法制备的法氏囊活性肽以不同的剂量肌肉注射45日龄母兔,同时颈部皮下注射兔瘟疫苗,结果表明:法氏囊活性肽能够加快兔瘟疫苗产生抗体的速度,提高抗体水平,延长抗体维持时间,一定剂量(4ml)的法氏囊活性肽疫苗组比免疫对照组的兔瘟HI抗体水平平均高2—3个滴度,T-淋巴细胞转化实验表明,法氏囊活性肽能够短暂地促进T-淋巴细胞的活化。以上结果表明,法氏囊活性肽作为一种免疫增强剂不存在种属间差异,但这种作用的发挥具有剂量依从性,而与投入体内的途径无关。本实验又研究了法氏囊活性肽对机体的增重及饲料转化率的影响,结果表明,与IBDV活苗混合滴鼻点眼,0.4ml法氏囊活性肽能够使鸡在免疫后的2个月内比对照组多增19%;而在接种灭活苗的同时肌肉注射法氏囊活性肽,0.8ml的剂量增重效果较好,能多增7.23%;肌肉注射家兔,4ml法氏囊活性肽能够使兔在免疫后1月内比对照组多增13%,这些增重组并有较高的饲料利用率。这说明法氏囊活性肽具有促生长的作用,而且这种作用没有种属间差异,但与剂量有一定的关系。……   
[关键词]:法氏囊活性肽;IBD灭活油苗;IBD活苗;兔瘟灭活苗;体液免疫;细胞 免疫;饲料转化率
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:河北农业大学2001年