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二氢茉莉酸丙酯(PDJ)对两种植物RNA病毒的影响

柴立红

  植物激素及人工合成的激素类似物作为植物生长调节剂已经广泛应用于诱导抗逆和作物增产、改善品质的生产实践,但它们对植物病毒的作用效果和机制,至今鲜见系统研究报道。二氢茉莉酸丙酯(PDJ)是一种人工合成的茉莉酸类似物。本研究用不同浓度的PDJ处理对两种常见的植物RNA:病毒—黄瓜花叶病毒(CMV)和烟草花叶病毒(TMV)分别在其模式植物—假酸浆(Nicandra physalodes)和烟草(Nicotiana tobaccum)上的影响进行定量测定,同时研究PDJ处理对CMV基因组RNA及其卫星RNA相对含量影响的差异,目的是探索该激素类似物对植物RNA病毒和卫星RNA的影响规律。PDJ对黄瓜花叶病毒的影响假酸浆接种CMV—YI 2天后,在接种植株上分别喷施不同浓度的PDJ,并在不同时间采取各浓度PDJ处理的假酸浆新鲜叶片0.2g,提取其总RNA,以~(32)P标记的CMV RNA3亚基因组启动子区的互补DNA作为探针,用RNA点杂交方法确定CMV病毒基因组RNA的负荷量,结果表明:PDJ对CMV RNA负荷量的影响具有浓度和时间效应。在喷施早期,PDJ对CMV的复制和RNA负荷量具有明显的促进作用;在喷施14天以后,大部分浓度的PDJ处理呈现对CMV复制和累积的抑制。但是,不同处理浓度之间,PDJ影响程度具有显著性差异。取0.3g侵染组织,以苋色藜为枯斑指示植物,在与点杂交检测对应的时间用半叶接种法对假酸浆叶片中CMV侵染体含量进行定量测定,其结果与RNA杂交结果的趋势基本一致。PDJ对黄瓜花叶病毒卫星RNA相对含量的影响CMV卫星RNA是小RNA分子寄生物,其大小通常为330~405个碱基,它依赖于辅助病毒CMV进行复制、包装和扩散。CMV-YI的卫星RNA具有396个碱基。用脱探针再杂交的方法,测定与CMV基因组RNA相同的PDJ处理浓度和时间间隔CMV卫星RNA的负荷量。PDJ处理后不同时间段,CMV卫星RNA与基因组RNA在系统寄主假酸浆上相对负荷量发生了变化:1)PDJ对CMV基因组RNA在假酸浆中的负荷量产生明显影响,而且显著影响卫星RNA相对负荷量,具有浓度效应和时间效应;2)PDJ对卫星RNA的影响与其对基因组RNA的影响不同:在PDJ施用的第7天和第28天时,相对抑制卫星RNA而促进CMV基因组RNA的复制和积累;在PDJ施用后期第42天时,相对促进卫星RNA而削弱CMV基因组RNA的复制和积累,即有选择地抑制或促进卫星RNA。PDJ对烟草花叶病毒的影响用RNA点杂交法和半叶接种法测定了0.001ppm~10ppm浓度PDJ处理3天后烟草组织中TMV RNA负荷量和接种体含量,结果表明:在此时间段,两种方法测定结果均显示高浓度(10ppm)PDJ处理明显促进TMV的累积。……   
[关键词]:二氢茉莉酸丙酯;黄瓜花叶病毒;烟草花叶病毒;基因组 RNA;卫星 RNA;接种体;负荷量
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:浙江大学2001年