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1、荧光定量逆转录——聚合酶链反应检测地中海贫血β与γ珠蛋白mRNA水平的研究2、脐带血移植治疗重型β地中海贫血的探讨

赖永榕

  目的 1、探讨实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)对血红蛋白珠蛋白mRNA水平检测的应用。2、研究地中海贫血病人外周血及新生儿脐带血中α与γ珠蛋白mRNA水平及临床意义。方法 用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应技术检测38例地中海贫血病人和25例正常对照组外周血以及23例新生儿脐带血中α与γ珠蛋白mRN水平。结果全部17例重型β地贫病人的γ/(β+γ)mRNA比值均增高,其平均值(7.83±22.17%)显著高于正常对照组(1.55±4.14%)(P<0.001)及轻型β地贫( 0.99±1.01%)(P<0.001 )。轻型β地贫及正常对照组的γ/(β+γ)mRNA比值两组比较无明显差别(P>0.05)。脐带血中γ/(β+γ)MRNA比值(44.08±22.41%)显著高于正常对照组(α<0.001)。脐带血中胎儿血红蛋白(HbF)比值(58.11±7.19%)也显著高于正常对照组(0.63±0.32%)(P<0.001)。FQ-RT-PCR方法采用全闭管检测,不需对PCR产物后处理,不仅避免了假阳性污染及其他潜在性误差,而且实时检测确保定量准确。结论 1.实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应技术是一种敏感性高、特异性强、定量准确的新方法,适合于血红蛋白珠蛋白mRNA水平的定量测定。2.重型β地贫病人的γ/(β+γ)mRNA比值显著高于正常人及轻型β地贫。γ/(β+γ)mRNA比值增高是重型β地贫病人的特征之一。轻型β地贫的γ/(β+γ)mRNA比值与正常人比较无明显差别。检测地贫病人的β与γ珠蛋白mRNA水平有助于地贫病人的临床诊断及疗效观察。3.脐带血中Y/(+Y)InRNA比值及HbF 比值显著高于正常对照组。对脐带血珠蛋白InRNA水平的研究有助于对人体发育过程中珠蛋白基因表达调控的了解。……   
[关键词]:地中海贫血;脐带血;珠蛋白mRNA;荧光定量PCR
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:广西医科大学2000年