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鸡传统性法氏囊病抗独特型抗体疫苗的研究

刘怀然

  鸡传染性法氏囊病(IBD)是危害养禽业的重要传染病之一,多年来对它的预防和控制主要是依靠常规疫苗的免疫接种。但常规疫苗的应用有其不可避免的缺点:灭活苗中可能残留活毒而导致潜在感染;各型弱毒苗对法氏囊都有不同程度的损伤作用;此外广泛应用弱毒苗,不利于传染病的检疫和控制,也会导致病毒毒力和抗原性的变异。为此,本实验进行了鸡传染性法氏囊病抗独特型抗体(抗-Id)疫苗的研究,旨在克服常规疫苗使用的弊端,探索研制一种安全、无污染的新型疫苗,为其今后在生产实践中的应用奠定理论基础,从而为控制和最终消灭IBD及其他传染病的免疫预防探索一条新思路。本实验通过传统的免疫血清学方法制备多克隆抗-Id。先在鸡胚成纤维细胞(CEF)上繁殖IBDV D_(78)株弱毒,经蔗糖密度梯度离心纯化后,免疫SPF初产母鸡。收集高免蛋,经氯仿去脂、Na_2SO_4盐析、结合DEAE_32离子交换层析最终得到了纯度很高的抗 IBDV特异性卵黄IgG(Ab1)。将此IgG作为免疫原免疫家兔,制得的兔抗血清中含抗-Id(Ab_2)。部分兔抗血清经(NH_4)_2SO_4盐析后,再经亲和层析吸收纯化,得纯化抗-Id。抗-Id的免疫化学鉴定中,ELISA竞争抑制和抑制实验结果表明,抗-Id能够与原始抗原IBDV竞争结合Ab1,也能够抑制Ab1与IBDV的结合,而且随抗-Id浓度增加,竞争和抑制作用均增强。表明此抗-Id中含有抗原“内影像”──Ab2β,符合抗-Id的免疫化学标准。抗-Id的体内功能鉴定实验中,鸡胚中和抑制实验结果表明,抗-Id可与IBDV中和抗体结合而使其失去中和能力,从生物学角度验证了抗-Id模拟原始抗原的功能。雏鸡免疫保护实验结果表明,抗-Id疫苗免疫鸡后,未出现毒副作用,可以保护雏鸡抵抗IBDV的攻击。其保护率和所用佐剂有关,弗氏佐剂(保护率为83.3%)效果优于普通白油佐剂(61.5%),而从总体看来,抗-Id免疫效果(保护率为69.5%)要弱于常规IBD疫苗(80%)。……   
[关键词]:传染性法氏囊病;抗独特型抗体;疫苗
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:东北农业大学2000年