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玉米醇溶蛋白微粒载体的构建表征、生物相容性及免疫原性评价

李凤

  玉米醇溶蛋白由于成本低、可生物降解、延展性强等优点,其作为药物递送载体的研究正受到越来越多的关注。本文以相分离法为基础,详细考察了各种因素对制备所得的微粒载体性质的影响,最终获得了一种简单易行的玉米醇溶蛋白微粒载体可控制备方法,并对相关机理进行了探讨。随后,本文进一步考察了玉米醇溶蛋白微粒载体在小鼠体内的组织相容性和免疫原性,为该类载体在生物体内的应用提供了重要参考依据。相分离法制备微粒载体的研究结果表明,通过调整不同的参数,可以得到重现性良好、粒径和zeta电位可控、且呈单分散的玉米醇溶蛋白纳米粒。滴加速率越快、温度越低、玉米醇溶蛋白浓度越低,制备所得的纳米粒粒径越小。综合控制混合速率和蛋白浓度两个参数,可以实现玉米醇溶蛋白微粒载体从纳米到微米尺度的可控制备。处方体系引入稳定剂酪蛋白酸钠,消除了上述参数对载体粒径的影响。但借助成型后再吸附两步法,获得了粒径可控、核-壳型玉米醇溶蛋白/酪蛋白酸钠微粒载体。该类型载体与传统杂合型玉米醇溶蛋白/酪蛋白酸钠载体相比,在药物包封率和可控药物释放方面优势明显。组织相容性实验结果表明,Balb/c小鼠体内注射剂量为800μg的玉米醇溶蛋白纳米粒,肌肉注射组在第三天出现轻微的炎症反应,但最迟于第七天即可恢复;皮下注射在第一天时呈现出严重的炎症反应,但第三天即可恢复正常的组织形态。上述结果表明,玉米醇溶蛋白纳米粒在小鼠体内产生的炎症反应是一过性的,生物相容性相对较好。免疫原性实验结果表明,肌肉注射不同粒径相同剂量的玉米醇溶蛋白纳米粒,在Balb/c小鼠体内引起的抗体强度相当,且免疫反应类型均属于Th2偏向型体液免疫。其中,250nm组的Ig G1/Ig G2a水平较其他组高,产生Th2型体液免疫的倾向性更强。免疫途径和免疫剂量相关研究结果表明,玉米醇溶蛋白载体在小鼠体内的免疫原性具有明显的免疫途径依赖性。其中,肌肉注射组产生的最高抗体滴度稍高于皮下注射组,且在一定范围内(200μg,600μg和800μg)呈现免疫剂量依赖性。而皮下注射的三个剂量组在抗体滴度方面没有显著性差异。小鼠体内抗体水平降低至平台期后,对其进行再次免疫,小鼠体内总抗体滴度可以迅速升高至与之前相当的最高水平,并在长时间内维持较高的抗体滴度。抗体亚型分析结果表明,在最高抗体滴度时的皮下注射组Ig G1/Ig G2a要高于肌肉注射组,但肌肉注射和皮下注射的Ig G1/Ig G2a与免疫剂量无关。上述结果表明,玉米醇溶蛋白微粒载体可以在小鼠体内诱发产生记忆性Th2型免疫反应。……   
[关键词]:玉米醇溶蛋白;纳米粒;药物传递载体;生物相容性;免疫原性
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:吉林大学2018年