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辽宁药用植物病毒病调查研究

吕娜

  近几年药用植物的种植面积不断扩大,病毒病对药用植物的危害也越来越严重,然而国内外对药用植物病毒病缺乏系统的研究,许多药用植物上的病毒种类并不明确。本文综述了国内外药用植物病毒病的研究概况,调查了辽宁省九种药用植物病毒病的发生情况并进行了系统深入的病原鉴定,取得了创新性研究成果,报告如下:1.在丹东凤城农科院短梗五加种植地发现,大量短梗五加植物感染病毒病。主要症状为花叶、叶片半黄半绿、叶片黄边、皱缩等症状,田间发病率高达到60%以上。摩擦接种后不侵染指示植物并且TMV (Tobacco Mosaic Virus)、CMV(Cucumber Mosaic Virus)、PVY(Potato Virus Y)、PVX(Potato Virus X)和WMV(Watermelon Mosaic Virus)血清学检测结果均为阴性。将采集的短梗五加样品送至百迈客公司进行sRNA深度测序,结果表明短梗五加可能含有大蒜病毒(Garlic virus, GV)、番木瓜环斑病毒(Papaya ringspot virus, PRSV)、隐形病毒(Stealth virus, SV)等5种病毒和柑橘裂皮类病毒(Citrus exocortis viroid, CEVd)。查阅文献设计特异性引物,经RT-PCR试验验证,短梗五加中含有CEVd。CEVd经核苷酸分析表明,短梗五加CEVd分离物与墨西哥CEVd株系7(FJ751925)的同源性高达99.7%。这也是国内首次报告短梗五加感染类病毒。2.对辽宁省部分药用植物种植栽培地调查发现,五味子、草本龙芽、苍术和锦灯笼植物有花叶、黄化、皱缩、褪绿、矮化等疑似病毒病表现症状。通过摩擦接种鉴别寄主反应,可知五味子、草本龙芽、苍术、锦灯笼样品接种普通烟NC89表现花叶:心叶烟上出现枯斑:番茄上出现花叶;千日红和苋色藜表现枯斑、褪绿等。使用TMV、 CMV、PVY、PVX、WMV 5种抗血清进行血清学检测,结果表明:五味子、草本龙芽、苍术、锦灯笼与TMV抗血清检测呈阳性反应,苍术与CMV抗血清检测呈阳性反应;设计TMV P126、TMV CP、CMV CP、PVY、PVX CP和WMV CP特异性引物,检测上述药用植物,结果表明:在五味子、草本龙芽、苍术和锦灯笼样品中均检测到TMV。序列同源性分析表明,五味子TMV分离物、锦灯笼TMV分离物都与山东省杏仁中分离出的TMV 1号(HE818450)同源性最高;苍术TMV分离物与澄江烟草中分离出的TMV(HE818410)同源性高达100%;草本龙芽TMV与山东杏仁中分离出的TMV2号(HE818449)的同源性最高。这是首次报道TMV侵染五味子、草本龙芽、苍术。RT-PCR并未检测到苍术中含有CMV,苍术是否感染CMV,尚需进一步研究。3.田间调查人参、北沙参、牛蒡和白头翁发现,一些植株表现黄化、脉坏死和花叶等疑似病毒病症状。采集样品于室内汁液摩擦接种到指示植物上,观察记载症状反应,结果表明,这些药用植物样品在千日红和苋色藜上均表现花叶、褪绿或枯斑,但不侵染其他指示植物。利用CMV、TMV、PVY、PVX和WMV5种抗血清进行检测结果表明,人参和北沙参样品与PVY抗血清呈阳性反应,但与其他抗血清呈阴性;牛蒡和白头翁样品与5种抗血清均呈阴性反应。综上述,推测这四种药用植物可能携带病毒,人参和北沙参样品中可能含有PVY,但均需进一步鉴定明确。……   
[关键词]:药用植物;病毒;检测;鉴定
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:沈阳农业大学2016年