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拟南芥IAM路径合成的IAA及其与逆境胁迫响应

李静

  生长素(IAA)是一种重要的植物激素,它调节植物生长、发育的多个进程,与植物的逆境胁迫反应关系密切。本研究将分别含有iaaH、GFP或RFP基因的两载体共转化到野生型拟南芥和含有生长素响应启动子DR5-GFP的拟南芥基因组中,利用CRE/loxP重组克隆系统激活报告基因GFP或RFP和目的基因iaaH共表达、不同生长素浓度下DR5驱动GFP的不同表达,检测了拟南芥体内IAA合成的吲哚乙酰胺(IAM)路径,并重点分析IAM路径合成的IAA在植物响应逆境胁迫中的作用。主要结果如下: 将已共转化的pⅠ-GFP/pGⅡ-iaaH、pGⅠ-RFP/pGⅡ-iaaH不同组合材料进一步纯化,分别通过100mM、150mM NaCl和150mM、300mM甘露醇胁迫处理,转基因植株长势优于对照植株,突出表现在侧根更长,数目更多,初步揭示iaaH表达提高了植物的耐盐性和抗旱性。 将pGⅠ-RFP/pGⅡ-iaaH载体组合转入含有生长素响应启动子DR5-GFP的拟南芥基因组中,在培养基中添加iaaH的底物吲哚乙酰胺(IAM),在150mM NaCl胁迫下转基因植株的生长受抑制程度小于对照植株。在0、5μMIAM、8μMIAM、150mM NaCl、150mM NaCl+5μMIAM、150mM NaCl+8μMIAM的不同处理条件下,细胞水平上观测不同培养基中植株的GFP表达量,以及RT-PCR检测3个生长素早期响应基因NTM2、IAA30、GH3.5的表达水平均有差异,证实植物体内存在生长素合成的吲哚乙酰胺路径;揭示在逆境条件下,一定浓度的IAA促进了植物生长和侧根发生,提高了植物的抗逆性。研究为揭示生长素在植物抗逆调控中的机制提供依据。……   
[关键词]:拟南芥;生长素;IAM;iaaH基因;DR5-GFP;抗逆性
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:哈尔滨师范大学2012年