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骨碎补总黄酮在OB-OC共育体系中对Glu-NMDAR-Ca~(2+)的影响

沈家珍

  目的: 随着神经骨骼信号通路(Neuroskeletal Signaling Pathways,NSSP)在骨代谢中起着越来越重要的作用,而其中的谷氨酸信号通路在骨吸收和骨形成的耦联机制起着的作用日渐突出,因此本研究试观察骨碎补总黄酮在OB-OC的共育体系中对谷氨酸转导信号的影响。 方法: 1.用1日龄的SD乳鼠提取成骨细胞和5日龄的SD乳鼠提取破骨细胞,建立OB-OC的共育体系。 2.用MTT法检测骨碎补总黄酮在OB-OC共育体系中对OB增殖的最佳量效关系。 3.实验分为空白对照组、骨碎补总黄酮组、MK801组、骨碎补总黄酮加MK801组。 4.按上述分组,分别检测骨碎补总黄酮在共育体系中对成骨细胞增殖、碱性磷酸酶(ALP)活性、破骨细胞抗酒石酸性磷酸酶(TRACP)活性、谷氨酸浓度及细胞内钙离子浓度的影响。 5.运用Real time RT-PCR方法检测骨碎补总黄酮共育体系中OB的NMDAR2亚基的mRNA的表达。 结果: 1.骨碎补总黄酮可以增强OB-OC共育体系中的OB增殖能力及分泌ALP的活性,并可降低OC的TRACP的活性。 2. OB-OC共育体系中OB有NMDAR2a、NMDAR2d mRNA表达。 3.骨碎补总黄酮在OB-OC共育体系中可促进OB中NMDAR2a、NMDAR2dmRNA表达。 4.骨碎补总黄酮可以提高OB中钙离子浓度,能降低OB中的谷氨酸的浓度。 结论: 1.骨碎补总黄酮(不同浓度)在OB-OC共育体系中均可增强OB的增殖能力及促进ALP活性,同时抑制OC的TRAP的活性。 2.骨碎补总黄酮在OB-OC共育体系中可通过提高NMDAR2mRNA的表达,同时可提高OB中钙离子浓度,并可以降低谷氨酸浓度。这可能是其防治骨代谢疾病的作用靶点之一。……   
[关键词]:骨碎补总黄酮;成骨细胞;破骨细胞;共育体系;谷氨酸;NMDAR;MK801
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:暨南大学2012年