手机知网 App
24小时专家级知识服务
打 开
手机知网|搜索

急性心肌梗死大鼠补体系统激活及药物干预的研究

刘晓雨

  目的:Wistar大鼠制备急性心肌梗死(AMI)模型,观察AMI补体系统活化状态以及活化标志物C3、C5b-9水平与补体介导心肌坏死程度的关系,探讨应用氟伐他汀、芪参益气浸膏预防性干预对急性心肌坏死后激活的补体系统和心功能状况的影响,并探讨药物的调节机制。 方法:1.70只雄性Wistar大鼠随机分为5组:空白对照组(A组,n=10)标准大鼠营养饲料喂养7天,无药物干预,不造模;假手术组(B组,n=12)标准大鼠营养饲料喂养7天,无药物干预,第8天开胸不造模;单纯AMI组(C组,n=18)标准大鼠营养饲料喂养7天,无药物干预,第8天制备AMI模型;AMI+芪参益气浸膏治疗组(D组,n=15),造模前给予芪参益气浸膏(100mg/kg/d)干预7天,第8天制备AMI模型;AMI+氟伐他汀治疗组(E组,n=15)造模前给予氟伐他汀(4mg/kg/d)干预7天,第8天制备AMI模型。2.冠状动脉前降支结扎法建立Wistar大鼠AMI模型。3.术后24小时后检测大鼠血流动力学指标(HR、SBP, DBP, MBP, LVSP, LVEDP,+dp/dt max,-dp/dt max),评估心功能变化。4.开胸经主动脉取血2ml,所有血液样本均经2000 r/min离心15 min后取血清,储存在低温冰箱(-80℃),随后用ELISA法检测血清C3、C5b-9的浓度。5.血流动力学检测完成后向心腔内注射10%氯化钾2—3m1使心脏停搏于舒张期处死大鼠,迅速取出心脏,去除左、右心房后,将心脏分成左心室、右心室,分别称左室重量(LVw)和右心室重量(RVw),并与体重(Bw)相除,得左、右心室相对重量(LVw Bw、RVW/BW).6.采集心脏组织,分别浸入10%中性甲醛中固定,固定的标本通过一系列梯度酒精进行脱水,使用二甲苯进行透明处理,在清除透明剂后在硬蜡熔点为56℃时进行包埋,制备成石蜡块。将石蜡块切成5“m厚度制成切片进行HE染色观察心肌组织病理变化。7.免疫组织化学染色检测补体C5b-9分别在心肌组织非梗死区、梗死边缘区、梗死区表达情况。 结果:1.A组及B组12只大鼠术后全部存活,C组造模存活9只,造模成功率为50%,D组造模存活9只,造模成功率为60%,E组造模存活12只,造模成功率为80%,C组、D组和E组三组间造模成功率差异无统计学意义(P>0.05)。总体AMI造模成功率为62.5%。2.各组间HR差异无统计学意义(P>0.05)。与A组、B组相比,AMI造模各组SBP、MBP、+dp/dt max、-dp/dt max均明显降低(P<0.05);AMI造模各组间比较,D组和E组SBP、MBP、+dp/dt max、-dp/dt max高于C组(P<0.05),但D组和E组间SBP、MBP、+dp/dt max、-dp/dt max差异均无统计学意义(P>0.05);与A组和B组相比,AMI各组LVEDP均明显升高(P<0.05);AMI各组间比较,D组和E组LVEDP低于C组(P<0.05),但D组和E组间LVEDP差异无统计学意义(P>0.05)。3.与A组和B组相比,AMI造模各组大鼠体内血清C3、C5b-9水平明显增高(P>0.05),AMI造模各组间比较,D组和E组血清C3、C5b-9水平低于C组(P<0.05),但D组和E组血清C3、C5b-9水平差异无统计学意义(P>0.05)。4.正常的心肌组织是没有补体蛋白沉积的,AMI造模各组间比较,D组和E组梗死区、梗死周边区C5b-9表达水平低于C组(P<0.05),但D组和E组间C5b-9表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。 结论:1.实验证实大鼠AMI有补体系统激活,血清补体C3、C5b-9水平及心肌梗死区、梗死周边区C5b-9沉积与正常、假手术组比较均有明显的升高。2.预防性应用芪参益气浸膏和氟伐他汀7天可明显抑制AMI后补体系统的激活,降低血清补体C3.C5b-9水平,减少大鼠心肌梗死区、梗死周边区心肌细胞C5b-9的沉积。3.芪参益气浸膏和氟伐他汀可能通过减少AMI时补体介导心肌损害发挥缩小心肌梗死面积、改善左室收缩功能的作用。……   
[关键词]:氟伐他汀;芪参益气浸膏;急性心肌梗死;补体C3;补体C5b-9
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:天津医科大学2011年
App内打开