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云南元江—红河流域乙型脑炎媒介蚊虫群落特征研究

龚道方

  目的:通过对云南元江-红河流域不同地理气候环境梯度中的媒介蚊虫组成、分布和对健康人群血清学及其媒介蚊虫乙型脑炎带毒调查,探讨该流域乙型脑炎媒介蚊虫物种多样性特征及其疾病的实际流行水平。 内容:(1)乙型脑炎媒介蚊虫群落特征调查:在元江-红河流域不同环境梯度(纬度和海拔)采用诱蚊灯通宵捕蚊,以观察媒介蚊虫的组成与分布等特点。(2)乙型脑炎血清学调查:在各观察点采集健康人群血清,采用血凝抑制实验检测健康人群乙型脑炎抗体IgG水平。(3)蚊虫乙型脑炎病毒自然带毒情况调查:对采集的部分蚊虫标本进行研磨,用RT-PCR、免疫荧光等实验方法进行病毒鉴定,上清液接种组织培养细胞以分离乙型脑炎病毒, 方法:(1)媒介蚊虫群落特征调查:在元江红河流域北纬23。-26。、东经100°-104。之间和海拔170-1642米之间的元江红河流域区域内,采用重点普查和抽样调查相结合的方法,选择不同经纬度(以每个纬度或经度为一水平梯度)、海拔(以每500米海拔高度为—垂直梯度)、地理气候及植被等梯度环境内的各类型生境地进行蚊虫媒介物种多样性及相关生物学的调查取样。方法采用诱蚊灯对不同环境梯度内的人、畜房通宵捕捉成蚊,以观察不同生境的蚊虫组成;通过不同环境内所获的蚊虫标本、资料和数据进行蚊虫多样性分析。(2)乙型脑炎血清学调查:在元江-红河流域的上中下游分别选取景东、新平、景谷、金平4县采集健康人血清,采用血凝抑制实验检测正常人群乙型脑炎抗体IgG水平。(3)蚊虫乙型脑炎病毒自然带毒调查:对现场调查中所捕获的成虫,经分类鉴定后分装,置于液氮罐内低温保存,带回实验室(P2或P3实验室)进行乙型脑炎病毒的检测或分离;蚊虫标本病毒检测或分离方法主要采取研磨、离心等处理后用RT-PCR、免疫荧光实验等方法进行鉴定,再通过接种组织培养C6/36细胞方法分离出乙型脑炎病毒。 结果:(1)共捕获蚊虫6属37种(亚种)87875只,其中三带喙库蚊和中华按蚊属于当地的优势蚊种。结果分析发现,本研究区域蚊类物种多样性与均匀度成显著正相关(r=0.951),与生态优势度成高度负相关(r=-0.976),与纬度呈负相关(r=-0.561),与经度梯度呈正相关(r=0.411),但与海拔梯度的变化及物种多样性的关系不明显(r=0.177)。(2)景东、新平、景谷和金平共采集各县正常人血清803份,乙型脑炎病毒IgG阳性率为61.89%,其中金平县阳性率最高(75.62%),并且1-5岁儿童年龄组的抗体水平相对较低(45.21%)。(3)经采用乙型脑炎病毒引物对2属2种40批3321只雌性成蚊进行乙型脑炎病毒RT-PCR检测,结果4株为阳性,其中从三带喙库蚊中检测到2株和中华按蚊2株;后经核酸序列测定分析证实为乙型脑炎病毒;这4株病毒均对C6/36细胞能产生明显的细胞病变,经间接免疫荧光试验为乙型脑炎病毒(JEV)。 结论:(1)三带喙库蚊和中华按蚊是元江-红河流域地区居民点的优势蚊种,蚊虫多样性及其丰富度与调查点所处的纬度梯度具有一定的关系。(2)该流域健康人群中流行性乙型脑炎病毒抗体水平较高,说明这些地区乙型脑炎流行程度较高。(3)乙型脑炎媒介复杂,三带喙库蚊和中华按蚊属于当地JEV的重要媒介。……   
[关键词]:元江-红河流域;流行性乙型脑炎;蚊虫群落;血清抗体;分离和鉴定
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:大理学院2010年