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芽胞杆菌分类学特征及其生防功能菌株筛选

刘贯锋

  本研究对从德国和瑞典菌种保存中心引进的50芽胞杆菌标准菌株,活化并进行冷冻干燥保存。并对保存的菌种进行了质量检测,结果表明冷冻干燥保存的芽胞杆菌活菌数高,纯度好。 通过形态特征、生理生化特征、16S rRNA测序鉴定、脂肪酸分析等方法,对芽胞杆菌标准菌株进行分类学的研究。 针对14种生化分类性状对芽胞杆菌进行生化鉴定,数值聚类分析结果表明在65%的水平下将芽胞杆菌分为6大聚类组。大多数芽胞杆菌接触酶反应、氧化酶反应、葡萄糖发酵、淀粉水解等呈阳性,而吲哚反应、柠檬酸反应、硫化氢反应等呈阴性。 制出芽胞杆菌16sRNA系统发育树,聚类分析结果将芽胞杆菌分为5大聚类。经16S rRNA序列同源性比较发现,GroupⅠ中蜡状芽胞杆菌(Bacillus.cereus),蕈状芽胞杆菌(Bacillus mycoides),苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis)同源性在98%以上,简单芽胞杆菌(Bacillus simplex)与嗜冷芽胞杆菌(Bacillus psychrosaccharolyticus)同源性100%,弯曲芽胞杆菌(Bacillus flexus)与巨大芽胞杆菌(Bacillus megaterium)同源性100%,GroupⅡ中有枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)与解纤维芽胞杆菌(Bacillus cellulosilyticus)同源性100%。GroupⅣ包括Bacillus farraginis,Bacillus ordii, Bacillus fortis同源性在97%以上。GroupⅤ包括梭形芽胞杆菌(Bacillus fusiformis)与球形芽胞杆菌(Bacillus sphaericus)同源性100%,巴斯德氏芽胞杆菌(Bacillus pasteurii)与嗜冷芽胞杆菌(Bacillus.psychrophilus)同源性在97%以上。GroupⅥ中包括Bacillus agaadhaerens,Bacillus clarkii同源性100%。中孢芽胞杆菌(Bacillus centrosporus)与溶硫胺芽胞杆菌(Bacillus thiaminolyticus)同源性在98%以上。 芽胞杆菌脂肪酸组成中均有15:0 ISO,另外14:0、15:0 ANTEISO、17:0 ANTEISO、17:0 ISO也存在大部分芽胞杆菌中,通过脂肪酸生物标记聚类分析将芽胞杆菌分为五大类,与16 rRNA聚类分组比较发现,FAME聚类分析结果与16S rRNA聚类分析结果有一定的一致性. 本文初步研究芽胞杆菌对大肠杆菌,青枯雷尔氏菌,香蕉枯萎病病原菌的拮抗作用,筛选出对青枯雷尔氏菌有拮抗作用的芽胞杆菌有11株,其中有较强抑制作用的有深褐芽胞杆菌(Bacillus atrophaeus ) ,蕈状芽胞杆菌( Bacillus mycoides ) ,冷解糖芽胞杆菌( Bacillus psychrosaccharolyticus),史氏芽胞杆菌(Bacillus smithii),球形芽胞杆菌(Bacillus sphaericus),溶淀粉类芽胞杆菌(Paenibacillus amylolyticus),内生芽胞杆菌(Bacillus endophyticus)。蜂房芽胞杆菌(Paenibacillus alvei)。对大肠杆菌有拮抗作用的有11株,有较强抑制作用的拮抗菌有缓慢芽胞杆菌(Bacillus atrophaeus),枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis),苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis),蜂房芽胞杆菌(Paenibacillus alvei)。筛选出对香蕉枯萎病病原菌有拮抗作用的芽胞杆菌有16株。其中芽胞杆菌左乳酸芽胞杆菌(Bacillus laevolacticus)对香蕉枯萎病病原菌的抑制率最高,达到为73.3%。……   
[关键词]:芽胞杆菌;生物学特性;系统分类;细胞脂肪酸;生物防治
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:福建农林大学2011年