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我国优秀单板U型场地滑雪运动员永生细胞库的建立与保存

刘宇

  人类遗传资源指代表人类基因的遗传材料,在现今世界,最能代表人类自身身体素质基因的人群,便是各个运动项目的优秀运动员,人类遗传资源是人类进行自身探索与研究不可替代的资源。优秀运动员永生细胞库的建立就是为了可以永久的保存人类与杰出运动能力相关的基因资源,同时解决以往实验研究的接力式进行与标本的暂时性采集中存在的矛盾,以便有效的对同一研究对象进行持久的连续性研究[1]。本研究以我国优秀单板U型场地滑雪运动员为实验对象,通过转化由B958细胞的培养得到EBV,建立运动员外周血B细胞永生细胞库,并对其永生化细胞进行细胞水平与分子水平的检测,得出如下结论: (1)本研究样本采集我国单板U型场地滑雪国家队运动员,其中包括多名世界杯冠军、世锦赛冠军、全国冠军以及成绩优秀的运动员,通过对这些优秀滑雪国家队运动员基因组DNA的提取及保存,永久保存了我国部分滑雪国家队运动员的遗传资源,从而可以为优秀运动员基因相关研究提供实验材料,在国内外还属首创。 (2)建立了B淋巴细胞进行转化、培养、传代的技术体系。在该技术体系中,本研究探索性的使用以GIBCO公司特级胎牛血清配制的全培养基对样本B淋巴细胞进行转化,以BIOCHROMAG公司优级血清配制的全培养基对永生化细胞进行培养和传代,从而大大节约了研究经费,并得到满意的实验结果。 (3)本研究取运动员血液中B淋巴细胞,通过EBV转化,运用悬浮培养法,成功构建了运动员永生细胞系,并对所建细胞系进行了各项生物学特性检测。建立了一套比较完善的生物学特性检测技术体系,为日后高山滑雪、越野滑雪、冬季两项、自由式滑雪等运动项目的研究建立理论技术基础。 ①对P10代细胞生长曲线的绘制,发现永生化细胞生长不呈普通细胞生长的“S”型曲线。虽与普通细胞的生长周期有着极大的差别,但符合永生细胞的增殖特点。 ②对永生化细胞凋亡与细胞周期的检测,发现永生化细胞随着细胞代次的增加,细胞凋亡率依然稳定,差异不显著。而在细胞周期中,分裂期随着代次的增加而增加,永生化细胞生长旺盛、稳定。 ③通过外源基因对永生化细胞的转化,表明永生化细胞的转化率很高,活力旺盛,具有表达外源基因的能力,可以作为转基因研究材料,也可用做未来基因治疗的载体。 ④同工酶,核型分析以及PCR-SSCP技术验证EBV转化的B淋巴永生化细胞并无细胞交叉污染,遗传性能稳定,适用于运动员基因的保存。 (3)本研究通过优秀单板U型场地滑雪运动员永生细胞库的建立,对长期以来优秀滑雪基因没有任何保存,运动优良基因随之丢失的现状得以改观。随着科学技术的发展,对日后基因研究、选材、治疗等起到材料支持作用。……   
[关键词]:永生化;运动员;细胞体外培养;细胞检测
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:哈尔滨体育学院2011年