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H5亚型禽流感DNA疫苗对鸭和鹌鹑的免疫保护效力研究

李俊平

  H5N1高致病性禽流感病毒(HPAIV)是严重危害家禽及野禽的病原之一,而且威胁着人类健康。近年来,H5N1亚型AIV流行的一个新特点是,感染对象种类不断增多,宿主范围不断扩大,水禽和鹌鹑等不仅能感染HPAIV,而且还大量死亡,因此,预防和控制水禽和鹌鹑感染禽流感,具有重要的公共卫生学意义。 目前,预防水禽和鹌鹑感染禽流感病毒主要依赖的是H5N1亚型禽流感灭活疫苗,但是灭活苗干扰临床检疫和检测及流行病学调查,因此,进行其他新型疫苗对水禽的免疫效力的探索研究必不可少。H5亚型DNA疫苗重组质粒pCAGGoptiHA5对鸡的免疫效果良好,可诱导产生高水平的HI及NT抗体;水禽群H5亚型禽流感DNA疫苗重组质粒pCAGGoAHHA对鸡也具有良好的免疫原性,基于此,本研究将进行这两种质粒对鸭以及鹌鹑的免疫效果评估,为DNA疫苗的临床应用提供必要的试验数据。 本试验用H5亚型禽流感DNA疫苗pCAGGoptiHA5对SPF鸭的免疫效果进行了安全性试验、免疫效力试验、最小免疫剂量测定、免疫日龄测定、免疫产生期测定、免疫持续期测定以及对其它异源病毒的免疫保护试验等全面的评估。H5亚型禽流感DNA疫苗pCAGGoptiHA5以大剂量200μg免疫4日龄SPF鸭后,免疫鸭采食、精神状态良好,免疫部位吸收良好,无任何临床以及病理变化,对SPF鸭具有良好的安全性;以50μg剂量免疫的效力试验表明,DNA疫苗pCAGGoptiHA5可以对异源HPAIV DK/HB/49/05(H5N1)(Clade2.3.4)的致死性攻击提供完全保护,具有良好的免疫保护效力;将DNA疫苗pCAGGoptiHA5分别以20μg、30μg和50μg不同剂量免疫3周龄SPF鸭,首次免疫后3周以同样剂量和方式加强免疫,加强免疫后两周用异源HPAIV DK/HB/49/05(H5N1)鼻腔途径进行攻击,结果,最低剂量30μg可对免疫鸭提供100%的完全保护(不发病、不排毒、不致死),而低于最低剂量对免疫鸭只提供80%的死亡保护;pCAGGoptiHA5以30μg剂量肌肉接种免疫2周龄和3周龄SPF鸭,间隔3周加强免疫,结果,不同周龄的SPF鸭免疫后均可完全抵御异源病毒的攻击,但3周龄免疫后诱导的HI抗体较高;分别对3周龄的SPF鸭在一次免疫后的第2和第3周、间隔3周两次免疫后的第1和第2周进行病毒攻击,以确定其免疫产生期,结果,一次免疫后3周可提供死亡保护,两次免疫后第1周可提供完全免疫保护;30μg的pCAGGoptiHA5在两次免疫后,在8个月观察期内其HI抗体平均水平为4.33 Log2;30μg pCAGGoptiHA5可对A/Duck/Liaoning/51/2005(H5N1) (Clade2.2)提供100%的免疫保护,对Clade2.3.2分支的HPAIVA/Duck/Guangdong/s1322/2010(H5N1)也可以提供87.5%的免疫保护。 为评估DNA疫苗对鹌鹑的免疫效力,本试验用两种DNA疫苗质粒,即pCAGGoptiHA5和pCAGGoAHHA分别对鹌鹑进行了免疫效力、最小免疫剂量、最佳免疫日龄的研究。结果显示:pCAGGoptiHA5和pCAGGoAHHA对鹌鹑均具有良好的免疫保护效力;能提供100%免疫保护的最小免疫剂量分别为15μg和30μg;最佳免疫日龄均为3周龄。 本研究结果表明:DNA疫苗质粒pCAGGoptiHA5和pCAGGoAHHA有望成为两个预防我国水禽和鹌鹑禽流感的DNA疫苗候选储备疫苗。……   
[关键词]:禽流感;DNA疫苗;pCAGGoptiHA5;pCAGGoAHHA
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:中国农业科学院2011年