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沙丁胺醇诱导β_2肾上腺素能受体下调细胞水平的研究

徐翼

  目的通过沙丁胺醇刺激的方法构建细胞水平β_2肾上腺素能受体(β_2 adrenergic receptor,β_2 AR)下调的模型,为研究β_2 AR下调的分子生物学机制奠定基础。 方法取正常BALB/c小鼠气道平滑肌细胞(airway smooth muscle cell, ASMC)进行原代培养(组织块贴壁法),第2-5代细胞经形态学及间接免疫荧光法进行鉴定,将第3-4代纯度在95%以上的ASMC随机分为两组:正常ASMC对照组(A组)和沙丁胺醇刺激组(B组)。采用RT-PCR和Western Blot分别检测对照组和沙丁胺醇刺激组β_2 AR mRNA及蛋白水平的表达情况。 结果(1)原代培养的ASMC呈典型的“峰谷”状生长,细胞浆内有与细胞纵轴平行的特异性平滑肌α-肌动蛋白丝的阳性表达,证实了平滑肌细胞的来源,并符合平滑肌细胞的形态学和生物学特性(本方法纯度可以达到95%-98%)。(2)沙丁胺醇刺激组β_2 AR mRNA的表达较对照组降低(P < 0.05),β_2 AR蛋白表达亦明显降低(P < 0.05)。结论成功构建了小鼠气道平滑肌β_2 AR下调的细胞模型,为进一步研究哮喘患者β_2 AR减敏的机制奠定了良好的基础。……   
[关键词]:β_2肾上腺素能受体;下调;气道平滑肌细胞;沙丁胺醇;细胞培养
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:南通大学2010年