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TGEV S基因重组乳酸菌对小鼠和初生仔猪的口服免疫研究

刘义

  猪传染性胃肠炎(Transmissible gastroenteritis of pigs, TGE)是由冠状病毒属成员——猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus, TGEV)引起的猪的一种高度接触性肠道传染病,以严重腹泻、脱水为主要临床特征,给各国养猪业造成的危害不亚于猪瘟、猪蓝耳病等一类传染病。针对肠道传染病的发病机制和黏膜感染的特点,预防TGE的有效措施是黏膜免疫接种,刺激肠道黏膜分泌SIgA,产生黏膜免疫保护,以期达到预防TGE的目的。国内外已有关于TGE疫苗的研究,主要包括弱毒疫苗、强毒疫苗和灭活苗,然而这些常规疫苗存在着不同的缺点,如弱毒疫苗易返祖;强毒疫苗毒力过强,易散毒;灭活苗只能注射免疫,无法获得分泌型SIgA;接种这些疫苗不能达到预期的免疫保护。因此,探索TGE新型疫苗是预防该病的发展趋势。 TGEV为单股正链RNA病毒,具有感染性,基因组由结构蛋白和非结构蛋白组成。主要结构蛋白有4种,即纤突蛋白S、外膜蛋白sM、膜蛋白M和核衣壳蛋白N,其中突出于病毒粒子表面、形成典型花瓣状囊膜突起的纤突蛋白是由TGEV的部分保护性抗原基因编码,经翻译表达的S糖蛋白具有良好的抗原性,是诱导机体产生中和抗体的主要结构蛋白。 本研究将已构建完成的含有TGEV S基因的重组乳酸菌pNZ8149-NZ3900大量培养、诱导表达后,分别灌胃免疫BALB/C小鼠、口服免疫初生仔猪,加强免疫后10天采集免疫动物的血液、粪便等病料,处理后用MTT法和间接ELISA法检测T淋巴细胞转化情况、血清抗体IgG、黏膜分泌型SIgA抗体水平。试验结果经统计分析表明,含有TGEV S基因的重组乳酸菌口服免疫小鼠和初生仔猪后,血清抗体IgG、粪便中的SIgA与对照组有明显的差异(P<0.05)。由此说明,含有TGEV S基因的重组乳酸菌具有良好的免疫原性,可以诱导机体产生良好的针对TGEV的黏膜免疫应答和全身免疫反应。 本试验以重组乳酸菌口服免疫小鼠和初生仔猪,诱导机体产生了全身体液免疫、局部黏膜免疫和细胞免疫,为开发新型TGE基因工程疫苗奠定了一定的基础。……   
[关键词]:猪传染性胃肠炎病毒S基因;重组乳酸菌;小鼠;初生仔猪
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:吉林农业大学2011年