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北方地区栽培柴胡的品种及质量研究

康玮

  目的:柴胡是常用的大宗药材。据1979年出版的《中国植物志》55卷第1分册记载,中国有柴胡属植物36种、17变种和7变型。此后,李颖、潘胜利等又相继发表了6个新种。其中作为药用的有25种,8变种、3变型。《中国药典》2010版收载的柴胡来源为伞形科植物柴胡Bupleurum chinense DC.或狭叶柴胡Bupleurum scorzonerifolium Willd的干燥根。按其性状不同,分为北柴胡、南柴胡。其性寒,味微苦,归肝、胆经。具有和解表里,疏肝升阳等功效,主要用于感冒发热、寒热往来等疾病。目前,野生柴胡资源日益匮乏,各大药市出现了大量的栽培柴胡。但是对栽培柴胡的品种以及质量等的系统研究较少,因此本实验收集了不同品种、不同产地及生长年限的栽培柴胡样品,对栽培柴胡的药源、品种、质量等方面进行调查研究,为栽培柴胡的质量评价以及广泛应用提供理论依据和支持。 方法:通过查阅大量国内外相关文献,进行综述;通过文献查阅和实地走访调查相结合的方式对栽培柴胡资源进行调查;采用原植物鉴别、药材性状鉴别、石蜡切片显微鉴别、TLC薄层鉴别、红外光谱鉴别相结合的方式对栽培柴胡的品种进行鉴定;采用2010版中国药典柴胡项下的含测方法对柴胡皂苷a、d进行含量测定;采用文献方法对柴胡皂苷c进行含量测定;采用水蒸气蒸馏法提取柴胡挥发油,利用GC-MS技术分析挥发油的化学成分;利用高效液相色谱建立不同品种栽培柴胡的HPLC指纹图谱,为品种鉴别提供帮助。 结果: 1.文献综述: 近年来柴胡属植物的研究主要集中在化学成分、药理作用等方面,在本草考证、资源分布、柴胡的品种鉴别及质量评价新技术等方面也有研究进展。对栽培柴胡的研究主要集中在栽培区域调查、含量测定、化学成分研究等方面。 2.栽培柴胡药源调查 调查结果发现栽培北柴胡种植面积较大的是甘肃、陕西、山西,河南、河北、内蒙也有分布;栽培南柴胡种植面积较大的是黑龙江;栽培三岛柴胡主要在河北安国、湖北英山等地种植,三岛柴胡目前主要被外商收购。 3.栽培柴胡品种鉴别 原植物鉴别:将不同品种的柴胡原植物标本与文献对比,结果与北柴胡、狭叶柴胡、三岛柴胡植物特征描述基本一致。 性状鉴别:观察不同品种的栽培柴胡性状,主要鉴别点是:主根的颜色、纤维性、药材气味等。栽培北柴胡主根顺直,分枝较少,根头膨大不明显,表面淡棕褐或棕黄色,质硬而韧,不易折断,断面呈片状纤维性。栽培狭叶(南)柴胡不分枝,顶端残留1个或数个茎残基,密披毛刷纤维状叶基,近根头部有多数紧密的环纹。表面棕红色或红褐色,质稍软,易折断,断面平坦,不显纤维性,具败油气。栽培三岛柴胡主根明显,常有多数细小分枝。表面淡黄色或淡黄棕色,有不规则细纵皱纹,且多见皮孔和细根痕。质坚韧,断面具有纤维性。 显微鉴别:观察不同品种的栽培柴胡根部的石蜡切片,主要鉴别点是:木栓细胞的列数、油管的数目、木质部的比例及纤维分布。栽培北柴胡木栓细胞3—5列,皮层狭窄。韧皮部有油管散在,内含油状物。形成层成环,木质部宽广,导管切向排列,直径15μm-52μm,木纤维较多,不同产地的北柴胡根的纤维性及纤维分布不同。导管与木纤维紧密连接成片状或排成1至数个断续环状。栽培南柴胡木栓细胞8—17列,韧皮部较宽,油管多数散在,周围分泌细胞5—8个,木质部导管较小,直径14μm-35μm,散在,木纤维少或无。栽培三岛柴胡木栓细胞4—6列,韧皮部宽广,油管散在,分布在皮层及韧皮部中,木纤维较少,导管与纤维集中在根的中心或排成断续环状,导管直径9μm-31μm。 理化鉴别:采用薄层色谱法,以柴胡对照药材、柴胡皂苷a、d对照品为指标,以乙酸乙酯-乙醇-水(8:2:1)为展开剂展开,喷以2%对二甲氨基苯甲醛的40%硫酸溶液,在60℃加热显色,置日光及紫外光灯(365nm)下检视。17批北柴胡供试品色谱中,在与对照药材及对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。狭叶柴胡与三岛柴胡的对应斑点较弱。采用红外光谱法,发现3个不同品种的柴胡在1741cm-1—400cm-1范围内有较大区别。 4.浸出物含量测定 2010版药典柴胡项下的规定是柴胡的浸出物含量不得低于11.0%。测定的48份栽培柴胡的浸出物含量平均值为21.1%,其中39份栽培北柴胡的浸出物含量平均值为21.2%,只有采自陕西的5号、6号样品不合格,合格率为94.87%。山西与甘肃的样品浸出物含量较高,陕西的样品含量较低。1—2年生的栽培北柴胡浸出物含量相对较高。5份三岛柴胡的浸出物均值是20.2%,与各地的北柴胡样品的均值相比略低。 5.柴胡皂苷含量测定 首次采用药典方法对栽培柴胡的柴胡皂苷a、d进行含量测定。2010版药典柴胡项下的规定是北柴胡的柴胡皂苷a、d的总含量不低于0.30%。含测结果表明,67份柴胡样品中,皂苷a、d含量的平均值分别为4.54mg/g、6.07mg/g,57份栽培北柴胡的皂苷a、d总含量均符合药典的标准,合格率100%。1份栽培南柴胡的皂苷a、d总含量是0.39%,5份栽培三岛柴胡的皂苷a、d总含量均值是0.57%。柴胡皂苷a、d的总含量在3.44 mg/g—31.13 mg/g间波动。45份柴胡样品皂苷c含量的平均值为3.34mg/g。6.挥发性成分研究 不同产地、不同品种的栽培柴胡的出油率不同。1年生和2年生的栽培北柴胡的出油率分别是0.15%、0.15%,两份3年生的栽培北柴胡的出油率分别是0.10%、0.12%。1年生的栽培三岛柴胡的出油率是0.20%。对各挥发油的成分进行分析后发现脂肪族化合物最多,其次是萜类成分。比较4份不同产地、不同生长年限的栽培北柴胡的挥发油成分,发现有12个共有成分。但比较北柴胡与三岛柴胡的挥发油成分,只发现4个共同成分。 7. HPLC指纹图谱研究 采用液相色谱法,确定了栽培柴胡的液相指纹图谱条件,发现15个不同批次的栽培北柴胡有12个共有峰,其中5批甘肃的样品的相似度均在0.9以上。5个不同批次的栽培三岛柴胡有9个共有峰。两个不同品种间有8个共有成分。 8.论文创新点 1.首次对北方地区栽培柴胡的药源、品种、质量进行系统的调查和研究,评价栽培柴胡质量,为栽培柴胡的广泛应用提供理论依据; 2.首次利用药典含测方法对栽培柴胡进行含量测定。……   
[关键词]:栽培柴胡;资源调查;品种鉴别;含量测定;挥发油;指纹图谱
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:北京中医药大学2011年
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