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中国特有小型猪IGFs基因的SNP分析及其在相关组织中表达规律的研究

郎松

  胰岛素样生长因子-1、2(IGF-1、IGF-2)及其受体基因是调控动物机体生长、发育和代谢的重要因子,可以通过调节细胞的增殖、分化和凋亡来影响各种组织的动态平衡以及功能。本文通过PCR-SSCP、半定量和实时荧光定量PCR方法,以小型猪——版纳微型猪和西藏小型猪为主要研究对象,大型猪——军牧猪和大白猪为对照,研究分析IGF-1、IGF-2及其受体基因的单核苷酸多态性(SNPs)以及相关组织间的表达规律。旨在探究小型猪与大型猪的生长性状在分子水平上的差异,为寻找小型猪体型矮小等相关理论奠定基础。 研究结果表明:(1)IGF-1基因在外显子3发生了G210A突变,外显子4发生了A440G、T455C突变;IGF-2基因在外显子3发生了A36T、G109A突变,外显子8发生了C53T突变;IGF-1R基因没有检测到遗传多态性;IGF-2R基因在外显子48发生了G384A突变,以上共7处碱基突变均没有引起氨基酸序列的变化。(2)半定量RT-PCR法检测IGF-1、IGF-2及其受体基因在4个猪种的心脏、肝脏、肾脏和肌肉组织中均有表达,其中IGF-1、IGF-2基因在4个猪种中肝脏组织表达量最高,军牧猪和大白猪肌肉组织表达次之,版纳微型猪和西藏小型猪肌肉组织最低;IGF-1R基因在4个猪种的肌肉组织表达量均为最低,版纳微型猪和西藏小型猪肝脏组织表达量最高,军牧猪和大白猪肾脏组织表达量最高;IGF-2R基因表达趋势与IGF-1R相同。(3)实时荧光定量PCR法检测IGF-1、IGF-2基因在4个猪种肌肉组织的表达规律,结果显示IGF-1基因在大白猪肌肉组织中表达量最高,版纳微型猪中最低,且差异显著(P<0.05);IGF-2基因在军牧猪肌肉组织中表达量最高,西藏小型猪中最低,且差异显著(P<0.05);小型猪种间、大型猪种间在IGF-1、IGF-2基因的表达差异均不显著(P>0.05)。 IGF-1、IGF-2基因有丰富的多态位点,但是部分多态位点存在着基因型缺失的情况,这可能是由于本实验所采用的小型猪样本为自交近交品系、基因型杂合度较低所致。小型猪与大型猪在基因型和基因频率中存在着极显著的差异,而在IGF-1R、IGF-2R基因中遗传多态性较低甚至没有,可能是由于IGFR基因功能的重要性使得其序列高度保守。半定量和荧光定量PCR法的结果显示,小型猪与大型猪在组织分布中有着明显的差异,特别是在肌肉组织中。由此初步推断,IGF-1、IGF-2及其受体基因可能是影响小型猪体型矮小的相关基因。……   
[关键词]:版纳微型猪;西藏小型猪;IGF-1;IGF-2;IGFR;SNP
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:吉林大学2011年
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