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盐酸吗啡对人胃癌MGC-803胞生长增殖的影响

覃怡

  目的:本研究通过观察不同剂量盐酸吗啡对人胃癌MGC-803细胞生长增殖的影响并分析其可能的分子机制,以期为吗啡在癌痛治疗中的应用提供临床指导。 方法:实验分为4组:对照组,0.1μmol/L吗啡组,10μmol/L吗啡组和1 mmol/L吗啡组。人胃癌MGC-803细胞培养至对数生长期,随机分为4组(n=54)。吗啡组分别将盐酸吗啡加入细胞培养液中,使吗啡最终浓度分别为0.1μmol/L、10μmol/L或1 mmol/L;对照组不加入任何药物,继续孵育。四唑盐(MTT)法和克隆形成实验观察细胞生长增殖的变化,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡,划痕实验检测各组细胞的迁移能力,透射电子显微镜观察各组细胞的超微结构;RT-PCR和Western blot技术检测各凋亡相关因子PTEN、caspase-9、NF-κB和survivin mRNA和蛋白质的表达。 结果:吗啡组人胃癌MGC-803细胞的生长速度均慢于对照组MGC-803细胞,0.1μmol/L吗啡组、10μmol/L吗啡组和1 mmol/L吗啡组细胞的增殖率分别为(81.89±6.44)%、(78.52±4.68)%和(78.53±5.68)%,明显低于对照组的100%(P<0.05);0.1μmol/L吗啡组、10μmol/L吗啡组和1 mmol/L吗啡组MGC-803细胞的克隆形成率低于对照组细胞的克隆形成率(P<0.05):各吗啡组人胃癌MGC-803细胞停滞在G2/M期的比例均增加,S期比例减少;0.1μmol/L吗啡组、10μmol/L吗啡组或1 mmol/L吗啡组人胃癌MGC-803细胞的凋亡率分别为(17.20±2.95)%、(19.13±3.86)%或(24.38±4.94)%,明显高于对照组的凋亡率(11.40±2.86)%(P<0.05);吗啡组细胞24h、48h迁移率明显低于对照组(P<0.05);透射电镜显示,各吗啡组人胃癌MGC-803细胞均出现明显的细胞肿胀、染色质边集、凋亡小体增多等现象,而且,吗啡孵育后MGC-803细胞内PTEN、caspase-9基因表达增强,而NF-κB活性降低、survivin基因表达减少。 结论:盐酸吗啡促进人胃癌MGC-803细胞的凋亡,使细胞周期停滞于G2/M期,降低人胃癌细胞的迁移能力,从而抑制人胃癌MGC-803细胞的生长增殖;吗啡促进胃癌细胞凋亡、抑制其生长增殖的机制可能与吗啡增强细胞内凋亡促进因子的表达、同时抑制凋亡抵抗因子的表达有关。……   
[关键词]:吗啡;胃癌;增殖;细胞周期;凋亡
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:广西医科大学2011年
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