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油桐花芽分化期外源激素对Tunglfy表达特性及光合作用的影响

刘儒

  油桐(Vernicia fordii(Hemsl.))是我国特有经济林木,栽培历史悠久,桐油是重要工业用油。而花芽分化是植物生殖过程的基础,直接关系到果实的产量和质量。本文研究了油桐花芽分化时期不同阶段,成花关键基因Tunglfy表达特性对激素信号的响应和不同激素刺激对光合作用的影响,为油桐花芽分化机制及外源激素调控提供了理论基础。主要研究结果如下: 1、通过比较不同浓度CTAB,不同抽提方法,不同沉淀方法,不同样品用量对油桐总RNA提取质量的影响,提出了改良CTAB法。经琼脂糖凝胶电泳检测,18S、28S、5.8S清晰可见,28S:18S接近2:1;OD260/OD280在1.7~1.9之间。说明改良CTAB法提取的总RNA的纯度和完整性较高。 2、分析植物肌动蛋白(β-Actin)基因的保守区序列,设计引物。以油桐花芽总RNA反转录的cDNA第一链为模板,利用RT-PCR扩增出长为400bp左右的cDNA片段,克隆入pMD18-T载体。测序和序列分析表明,获得了大小为396bp的cDNA片段,该片段与蓖麻等有较高的核苷酸同源性,达到了97%。 3、以油桐肌动蛋白作为内参基因,以油桐花芽分化关键时期不同阶段,不同激素处理的油桐嫩芽的RNA反转录的cDNA为模板,用Tunglfy基因引物和肌动蛋白基因引物进行PCR扩增,琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物,以目的基因与内参基因的电泳条带亮度值的比值作为Tunglfy相对表达量,发现100mg/L脱落酸对Tunglfy的表达具有明显的促进作用,三种不同浓度6-BA对油桐Tunglfy的表达具有抑制作用。 4、选择GA 200mg/L、100mg/L;ABA 200mg/L,50mg/L;6-BA100mg/L,25mg/L处理的油桐为材料,用美国Li-cor公司生产的Li-6400便携式光合测定系统测定油桐净光合速率等指标,分析发现赤霉素对油桐光合作用具有明显的促进作用,高浓度对净光合速率的促进作用要强于低浓度。……   
[关键词]:油桐;外源激素;半定量RT-PCR;Tunglfy;光合作用日变化
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:中南林业科技大学2010年