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竹子精华水的成分分析及生物学活性研究

张建友

  竹茹,为禾本科竹亚科中青秆竹、大头典竹或淡竹等的茎秆外皮层或次其层,是一种常用的中药材,具有多种药理活性。竹子精华水(WEBS)是竹茹超临界CO2流体萃取时得到的水分级相,性质稳定。本文以WEBS为研究对象,首先采用氯仿、乙酸乙酯、正丁醇等有机溶剂分步萃取其中的有效成分,进行定性和定量分析;利用琼脂平板扩散法研究WEBS对常见食品腐败菌的抑菌能力,同时分析其抑菌成分,并观察常规加热处理方法对其抑菌性能的影响;采用体外无细胞系和黑色素B16细胞两种体系评价了WEBS的美白作用及机制;以熊果苷和市售防晒化妆品为参考研究了WEBS的抗紫外辐射性能;最后对WEBS的皮肤和粘膜安全性进行了评价,现将主要结果归纳如下: (1)竹子精华水(WEBS)中总黄酮、内酯、酚酸、总糖和蒽醌类化合物的含量分别为0.24 mg/mL,3.65 mg/mL,0.20 mg/mL,0.80 mg/mL和5.18μg/mL;检测出挥发性化合物28种,主要是醛、醇、呋喃、酮类和酚类,C6-C8中等链长的含氧化合物占主导地位。 (2)利用琼脂平板扩散法研究了WEBS对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、黑曲霉、桔青霉菌、啤酒酵母的抑制作用,抑菌效果与浓度呈正相关,最小抑菌浓度(MICs)在4.9~32 mg/mL之间;对细菌的抑制作用明显强于酵母和霉菌,其中对枯草芽孢杆菌的抑制效果最显著;不同的热处理条件对抑菌效果影响不大,甚至121℃、4s的超高温瞬时处理也不影响其抑菌活性,表明WEBS中所含的抑菌成分具有很好的热稳定性。 (3)以小鼠恶性黑色素瘤细胞(B-16细胞)为受试细胞株,分别以从天然植物中提取的公认的美白产品——熊果苷和化学物质氢醌为阳性对照,通过测定黑色素细胞的增殖率、细胞内黑色素含量、细胞内酪氨酸酶活性、细胞毒性以及对体外蘑菇酪氨酸酶活性的抑制等指标,表明WEBS可以抑制B-16细胞增殖,当受试浓度为5mg/mL时,细胞存活率为65%;对细胞酪氨酸酶的抑制率随着试样浓度的增加而增加,当浓度为5mg/mL时,抑制率达75.3%,优于同浓度的熊果苷;WEBS所试浓度均能显著降低黑色素的含量,并呈浓度依赖关系:不同浓度的WEBS对蘑菇酪氨酸酶均有一定的抑制作用,在浓度为16mg/mL时,最大抑制率为89.05%,半抑制浓度(IC50)为6mg/mL。此外,WEBS的细胞毒性低于同浓度的熊果苷和氢醌,表现为细胞密度降低,对细胞形态结构的破坏较小。 (4) WEBS对短波紫外线(295nm左右)有较强吸收,对长波紫外线的吸收能力较弱;吸收紫外线的能力在较低浓度(0.3mg/mL)时已达到防晒剂的防晒指数要求,且随浓度的提高而增强。同时,可以有效保持角质层水分含量,使水分经皮肤散失变小,具有作为护肤因子研究开发的价值。 (5)用小鼠和家兔为实验动物,通过急性毒性试验、多次皮肤刺激试验、急性眼刺激试验等进行安全性评价。结果表明,小鼠经口急性毒性最大耐受量,雌、雄两性均大于5000mg/kg体重,按急性毒性分级标准规定,属于实际无毒类;家兔多次皮肤刺激性试验中,每天每只动物皮肤刺激反应积分均值为0,属于实际无刺激性;家兔急性眼刺激性试验中,受试物对家兔眼刺激性最高积分均值角膜、虹膜、结膜均为0,属实际无刺激性。证明WEBS具有很高的安全性,可用于特殊用途化妆品领域。 综上所述,竹子精华水(WEBS)中富含黄酮、内酯、多糖、有机酸等生物活性物质,具有较强的抗菌、抑菌能力,并能通过多种途径抑制黑色素的生成,同时有一定的防晒和保湿效果,具有作为特殊用途化妆品的功能性成分进行开发的潜力。……   
[关键词]:竹子精华水;化妆品功能因子;抑菌;美白;防晒;保湿;安全性评价
[文献类型]:博士论文
[文献出处]:浙江大学2010年
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