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高产GABA的红曲菌种选育以及发酵工艺优化

雷恒

  本文通过紫外诱变、氯化锂诱变、微波诱变三种方法对红曲霉菌种进行诱变筛选,对初筛得到的74株诱变菌种,以Berthelot法测定γ-氨基丁酸(GABA)含量进行进一步复筛,得到28株高产GABA的菌株。其中,L10菌株的产量最高,达到6.67 mg/g,比原菌高产373%,产量提高显著。 用Berthelot法测定GABA含量,样品超声提取时间为60 min,然后取1.0 mL待测样品,加0.6 mL0.2 mol/L硼酸缓冲液,加入2 mL 6%苯酚溶液和质量分数10%的次氯酸钠溶液0.8 mL,沸水浴加热8 min,然后冰浴10 min,在640 nm波长处测定吸光值,以标准曲线法确定γ-氨基丁酸的质量分数,该方法灵敏度较高、快捷。 选取遗传性状稳定的红曲霉菌株L11进行固态发酵试验,对其工艺条件进行了优化,发现固态发酵最佳培养温度是30℃,最佳培养时间是10 d。考察碳源、氮源以及无机盐离子对发酵的影响,发现固态发酵产GABA的最佳碳源是葡萄糖;最佳氮源是大豆蛋白粉,培养基中添加0.15%的KH2PO4对产GABA有利。经过正交试验后确定L11固态发酵产GABA的较佳工艺条件为:葡萄糖5%,大豆蛋白粉4%,KH2PO4 0.15%,ZnSO4 0.3%,NaNO3 0.5%,MgSO4 0.1%,在此条件下GABA产量可达到5.08 mg/g。 通过考察温度、加热时间、pH、防腐剂、金属离子以及抗氧化剂等因素对GABA的影响,发现GABA性质比较稳定,受防腐剂、金属离子和抗氧化剂的影响比较小,而受高温影响较大,100℃下水浴80 min可使其含量降低39%,pH在4~5和碱性条件下时,GABA也不太稳定。……   
[关键词]:γ-氨基丁酸;红曲;诱变;优化;稳定性
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:武汉工业学院2010年
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