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RT-PCR和荧光定量RT-PCR检测CSISV在SPF雏鸡体内分布

朱国坡

   鸡生长与免疫抑制综合征病(暂命名,Chicken Stunt and Immunosuppression Syndrome Virus)是造成家禽生长和免疫抑制的重要传染性病之一。本课题在前期研究的基础上,应用RT-PCR和TaqMan荧光定量RT-PCR方法,对SPF雏鸡人工感染后病毒在鸡体内的分布进行了研究,旨在找到病毒的亲嗜器官和在鸡体内的生长规律。 根据CSISV全基因序列设计出了一对大小为540bp引物F1/F2、一对大小为117bp引物F3/F4及一条特异性探针。运用已建立的RT-PCR方法研究7日龄SPF雏鸡人工感染CSISV-ZZ2004毒株后病毒在鸡体内的分布和排毒情况。结果表明,病毒感染后在SPF雏鸡所有15个器官中均检测到了病毒,感染后最先于第9h在肺脏、气管和直肠中检测到病毒核酸,最晚于第120h在心脏中检测到病毒核酸;408h后所有组织均呈病毒核酸阴性。感染后能检测到病毒核酸阳性持续时间最长的是胰腺(384h),持续时间最短的是心脏(72h)。CSISV病毒具有广泛的组织嗜性,胰腺、法氏囊、肾脏、肺脏、直肠、胸腺、盲肠病毒持续时间都在288h以上,为病毒重要的靶器官。人工感染后第12h到第720h SPF雏鸡能持续地排毒。 运用建立的TaqMan荧光定量RT-PCR方法对上述SPF雏鸡各器官病毒的含量进行了测定。结果表明,人工感染后所有组织中病毒核酸的最低含量均在1.57E+06 copies/μL以上,各组织中的病毒核酸含量均呈现先上升后下降的趋势,并均于72h~168h出现峰值;人工感染后48h~216h肾脏、法氏囊、肺脏、气管、腺胃、盲肠、直肠中病毒核酸含量均高于其他组织,拷贝数都在1.00E+08以上,说明这些器官是病毒复制的主要器官。……   
[关键词]:RT-PCR;TaqMan荧光定量RT-PCR;鸡生长与免疫抑制综合征病毒;病毒分布
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:河南科技学院2010年