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青海省四个地区暗紫贝母遗传多样性RAPD分析

龚伯奇

  暗紫贝母(Fritillaria. unibracteata Hsiao et K.C.Hsia)系百合科(Liliaceae)贝母属(Fritillaria)植物,是一种重要的药用植物。采用RAPD技术对青海省四个产地的23个暗紫贝母材料进行遗传多样性分析,为揭示我省暗紫贝母资源的遗传背景提供依据,为我省暗紫贝母优良品种的选育及其种质资源的保护、评价和利用提供基础资料。主要研究结果如下: 1.本试验对RAPD反应体系中的5个重要因子进行了正交试验,筛选出最优的反应体系,并在此最优体系的基础上,分别对退火温度、扩增循环数进行了单因素试验,确定了一套最佳的暗紫贝母RAPD反应体系和PCR扩增程序,即模板DNA 25 ng,随机引物0.8μmol/L,dNTPs 0.20 mmol/L,Mg2+ 1.5 mmol/L,Taq酶0.8U。PCR扩增程序为:95℃预变性5 min,94℃变性45 S,37℃退火1 min,72℃延伸2 min 40个循环,72℃延伸5 min,4℃终止反应; 2.从60条随机S系列引物中筛选出10条有效引物,占总数的16.7%,这些引物能在23个暗紫贝母总DNA上扩增出清晰度高、稳定性强、重复性高的条带。10条引物共扩增出95条带,其中多态性带67条,占总扩增条带的70.5%,每个引物可扩增出5~12个多态性条带,平均6.7条; 3.根据引物S23对23个暗紫贝母样品的扩增结果构建0/1矩阵,在NTsys2.10软件上计算出各品种间的相似系数,品种间的相似系数决定了品种间的亲缘关系,相似系数越大,亲缘关系越近。23个暗紫贝母样品间的相似系数介于0.3333~0.9167之间,平均相似系数为0.625,其中久治县的4号和6号植株相似系数最大为0.9176,表明两者亲缘关系最近。聚类分析结果表明:四个样地的23个样品,每个样地的样品均聚在一类,表明相似系数与样品的地理位置密切相关。……   
[关键词]:暗紫贝母;RAPD;遗传多样性;相似系数
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:青海师范大学2010年