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电针“百会透前顶”穴区对帕金森病小鼠干预性的基础实验研究

张霁

   目的:研究电针百会透前顶穴区治疗PD的疗效和作用机理,探讨针刺对多巴胺能神经元的修复保护机制。 方法:本研究选用C57BL/6品系小鼠100只,10~11周龄,体重20±2g,随机分成正常组、模型组、电针组和美多巴组,每组25只。模型组、电针组和美多巴组给予MPTP腹腔注射(0.03mg/g体重),日一次,连续7天制备PD小鼠模型;正常组给予生理盐水腹腔注射。实验第8天开始,电针组选取百会透前顶穴区,电针频率2~100Hz,电压1V,日一次,每次20min,连续14天;美多巴组给予美多巴悬浊液灌胃(0.12mg/g体重),日一次,连续14天;正常组和模型组给予生理盐水腹腔注射。每组小鼠实验前进行爬杆、悬挂行为学观察;实验第22天处死小鼠,取黑质检测脑内GSH含量和GSH-PX活性变化反映多巴胺能神经元变性缺失情况,并进行光镜下形态学观察,应用免疫组织化学法观测脑黑质Bcl-2和Bax表达情况以反映细胞凋亡情况;应用原位杂交法观察BDNF mRNA阳性表达及积分光密度,采用逆转录聚合酶链反应测定Nestin改变,检测NSC的数量及其增殖、分化情况。所获数据应用SPSS13.0软件分析处理。 结果:1.悬挂实验和爬杆实验评分:模型组小鼠评分降低,电针组和美多巴组小鼠评分升高。2.GSH和GSH-PX活性检测:模型组小鼠黑质中GSH含量明显减少、GSH-PX活性降低;电针组和美多巴组GSH含量明显增多,GSH-PX活性增高。3.细胞凋亡观察显示:Bcl-2免疫阳性细胞数观测:模型组明显减少;电针组和美多巴组则增多;Bax免疫阳性细胞数观测:模型组明显增多;电针组和美多巴组明显减少。4.BDNF mRNA表达观测:阳性细胞数及积分光密度结果显示:模型组均减低;电针组及美多巴组均有增高;而电针组与美多巴组BDNF mRNA阳性细胞数比较无差异;积分光密度比较则具有统计学差异。5. Nestin mRNA表达观测:平均光密度结果显示:电针组与正常组、模型组和美多巴组比较,Nestin mRNA表达均显著增高。美多巴组与模型组比较,则无显著差异。 结论:电针百会透前顶穴区可以改善PD小鼠的行为学障碍;使黑质内神经元细胞抗氧化能力增强,抑制自由基的产生;电针可以抑制黑质多巴胺能神经元的凋亡;诱导、增加PD模型小鼠脑内BDNF mRNA阳性表达;促进NSC的激活、增殖、分化,促进神经细胞的代偿性修复,提示电针百会透前顶穴区可以达到对PD小鼠黑质内多巴胺神经元的修复及保护作用,具有较好的治疗效果。……   
[关键词]:电针;百会;前顶穴区;帕金森病;Bcl-2/Bax;BDNF mRNA;Nestin mRNA
[文献类型]:博士论文
[文献出处]:黑龙江中医药大学2010年