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肝康颗粒对免疫性肝损伤模型小鼠CD_4~+、CD_8~+、IL-12及IFN-γ的影响

刘松灿

  【目的】探讨肝康颗粒对刀豆蛋白A(Concanavalin A, ConA)所致小鼠免疫性肝损伤的保护作用及对CD_4~+(cluster of differentiation 4, CD_4~+)、CD_8~+(cluster of differentiation 8, CD_8~+)、白细胞介素12(Interleukin-12, IL-12)及γ干扰素(Interferon-γ, IFN-γ)的影响。 【方法】昆明种小鼠60只,体重18-22g,随机分为6组,分别为空白对照组,模型组,香菇菌多糖片(Lentinus Edodes Mycelia Polysacharide Tablets, LEMP)组,肝康颗粒高、中、低剂量组,每组10只。造模前连续7天给小鼠灌胃,每天1次。高、中、低剂量组分别按12.5g/kg,10.0g/kg,7.5g/kg的剂量灌服肝康颗粒溶液;香菇菌多糖片组灌服香菇菌多糖片混悬液0.06g/kg;空白对照组和模型组灌服等体积的生理盐水。于第7天(禁食14h,不禁水),末次给药1h后,开始造模,除空白对照组外,其余各组均以0.02g/kg按体重给予ConA尾静脉注射1次,空白对照组给予等体积的生理盐水尾静脉注射。造模后6h处死。分别检测血清丙氨酸氨基转移酶(Alanine Aminotransferase, ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(Aspertate Aminotransferase, AST),T辅助细胞CD_4~+,T抑制细胞CD_8~+,IL-12, IFN-γ,观察肝组织普通病理形态学变化和肝、脾、胸腺指数。 【结果】1)肝功能变化:与空白组比较,模型组小鼠血清ALT、AST活性显著升高;与模型组比较,肝康颗粒各给药组小鼠转氨酶明显降低(P<0.05),以高、中剂量组最明显。2)CD_4~+、CD_8~+改变:模型组小鼠全血CD_4~+水平明显降低,CD_8~+水平明显升高,与空白对照组比较有统计学意义(P<0.05),肝康颗粒各给药组及香菇菌多糖片组能明显提高全血CD_4~+水平、降低CD_8~+水平,其中肝康颗粒高剂量组和香菇菌多糖片组提高CD_4~+水平效果明显,与模型组比较具有统计学意义(P<0.05);肝康颗粒各剂量组均能明显降低CD_8~+水平,其中以肝康颗粒高剂量组效果明显,与模型组比较有统计学意义(P<0.05)。3)病理学变化:模型组小鼠可见明显的肝细胞水样变性、点状坏死等损伤性改变;与模型组比较,各给药组病理学改变减轻,以肝康颗粒高剂量组减轻明显。4)IL-12的改变:模型组小鼠血清中IL-12含量明显升高;肝康颗粒各给药组小鼠IL-12含量较模型组降低(P<0.05)。5)IFN-γ的改变:模型组小鼠血清中IFN-γ含量明显升高;肝康颗粒各给药组小鼠IFN-γ含量较模型组降低(P<0.05)。6)脏器指数的改变:模型组小鼠肝、脾、胸腺指数明显高于空白对照组(P<0.05),尤以肝、脾指数改变明显(P<0.01);各给药组均可降低脏器指数,与模型组比较有明显的差异(P<0.05),且呈剂量依赖性。 【结论】1)肝康颗粒具有益气健脾、补益肝肾、清热解毒、祛湿化瘀之功效,可有效防治免疫性肝损伤(Immunological liver injury, ILI)。2)肝脏是ConA体内诱导毒性的靶器官,CD_4~+T细胞的活化与ConA诱导的肝损伤关系密切,其在ConA性肝损伤模型中是作为效应细胞起作用的,IFN-γ和IL-12是ConA诱导免疫性肝脏损伤模型中最重要的细胞因子,这两个因子是ConA诱导免疫性肝损伤的病理机制之一。3)肝康颗粒具有较好的抗ConA诱导免疫性肝损伤模型的效果,且呈剂量依赖性。4)肝康颗粒的保肝作用通过提高CD_4~+含量,降低CD_8~+、IL-12、IFN-γ含量等环节来实现的。……   
[关键词]:免疫性肝损伤;肝康颗粒;刀豆蛋白A;CD_4~+;CD_8~+;IFN-γ;IL-12
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:河南中医学院2010年