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滨海湿地药用植物二色补血草化学成分及HPLC化学指纹图谱研究

张敏

  蓝雪科Plubaginaceae补血草属Limonium Mill植物系盐生植物,广泛分布于我国东北、华北、陕、甘、宁以及苏北等地,共包括17个种,其中中华补血草Limonium sinense和二色补血草L imonium bicolor为我国最常见的补血草属植物。作为传统中药,有补血、止血、散瘀、调经、益脾、健胃之功效,可用于治疗宫颈癌和功能性子宫出血等症。现代研究表明,补血草属植物主要含有无机元素、氨基酸、甾体、黄酮、生物碱、鞣质、多糖、挥发油等化学成分,并显示出抗菌消炎、抗病毒、抗氧化、抗衰老、保肝、抗癌等多方面药理作用。 特殊环境生物次级代谢产物一直是天然药物化学家所特别关注的对象。二色补血草是黄河三角洲滨海湿地的优势耐盐植物种群之一,但到目前为止,少见其系统化学成分及生物活性研究报道。为寻找二色补血草的药效活性成分,探讨盐生植物次级代谢产物与盐胁迫环境的关系,本文对二色补血草进行了系统的化学成分研究。采用薄层层析(TLC)、硅胶柱层析(CC)、凝胶(Sephadex LH-20).反相柱层析(ODS)和高压液相(HPLC)等现代色谱分离方法,从二色补血草甲醇提取物的石油醚-乙酸乙酯萃取液中,共分离得到了27个化合物,利用各种现代波谱技术:核磁共振(1D,2DNMR)、质谱(EI-MS、ESI-MS、FAB-MS、HR-FAB-MS等)和红外光谱(IR)确定了23个化合物的结构,分别为:β-谷甾醇(1),豆甾烷-3,6-二酮(2),豆甾-4-烯-3,6-二酮(3),6β-羟基-豆甾-4-烯-3-酮(4),麦角甾-4,6,8(14),22-四烯-3-酮(5),麦角甾-5-烯-3-醇(6),麦角甾-5,7,22-三烯-3β-醇(7),5α,8α-过氧化麦角甾-6,22-二烯-3β-醇(8),5α,8α-过氧化麦角甾-6,9,22-三烯-3β-醇(9),植物醇(10),(-)-北美鹅掌楸脂素-C(11),Medioresinol (12),松脂素(13),正十六烷酸(14),十八碳二烯酸(15),十八碳二烯酸单甘油酯(16),9,12,15-十八碳三稀酸单甘油酯(17),没食子酸(18),没食子酸甲酯(19),3,5-二羟基-4-甲氧基苯甲酸(20),3-O-methylgallic acid (21),杨梅苷(22),邻苯二甲酸二异丁酯(23)。其中,化合物2,3,5~9,11~13,16,17,20,21均为首次从该植物中分得。 以11批药材为样本,采用HPLC法,通过色谱条件的优化和系统适应性试验,建立了二色补血草的HPLC指纹图谱,指纹图谱中包含17个共有峰。系统适应性试验(精密度、重现性、稳定性)相对标准偏差均小于5%,符合指纹图谱的技术要求。采用建立的二色补血草的HPLC指纹图谱特征峰的相对保留时间参数对未鉴定样品的比较分析,证明二色补血草的HPLC指纹图谱可用于快速定性物种鉴别。同时,以分离得到的没食子酸和杨梅苷为指标成分,建立了同时测定没食子酸和杨梅苷的含量分析方法,方法的验证性试验数据(精密度、重现性、稳定性、回收率)表明,所建立的方法符合定量分析方法学要求。没食子酸和杨梅苷的含量测定结果显示,不同地区的二色补血草药材的没食子酸和杨梅苷含量差异较大,两种指标成分含量随盐度升高有增加趋势,在偏碱性土壤(PH=7.5-8)含量较高。……   
[关键词]:二色补血草;化学成分;HPLC;指纹图谱;含量测定
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:中国海洋大学2010年