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中药加味四逆散对血吸虫病小鼠肝纤维化治疗作用的实验研究

蔡锐

  目的:观察中药复方加味四逆散水煎剂对血吸虫病小鼠肝纤维化形成的影响。 方法:NIH白鼠(♀♂各半)随机分为5组:A组(正常对照组);B组(模型组);C组(吡喹酮组);D组(吡喹酮+加味四逆散组);E组(吡喹酮+秋水仙碱组)。除正常组小鼠外,每只小鼠皮肤用盖玻法,人工感染日本血吸虫尾蚴26±2条。病理观察小鼠肝组织有肝纤维化形成后,各小鼠于感染后的第21天开始治疗,D组每天灌服加味四逆散浓缩水煎液0.2 ml/每鼠/次(按体表面积换算后等量灌胃0.0865g/次/20g鼠每日2次),E组每天灌服秋水仙碱溶液每鼠0.2ml/次/天,每日2次,A、B、C组灌服生理盐水0.2ml/20g。各组小鼠连续治疗44天后,C组、D组、E组在感染后第45天时,分别予以吡喹酮300mg/kg一次性灌胃进行杀虫处理,3天后各组小鼠继续按原给药。感染治疗第78天小鼠心脏采血生物化学法检测小鼠血清ALT和ALB含量,放免法测定血清PCⅢ和HA含量;取肝组织、脾组织称重计算脏器系数;肝组织匀浆测定HYp含量;肝组织病理切片观察肝病理变化,免疫组化法检测小鼠肝组织中Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原;采用RT-PCR检测TGF-β1mRNA的表达。 结果:1.脏器系数(1)肝脏器系数正常对照组最低,模型组、吡喹酮组、加味四逆散组、秋水仙碱组均明显高于正常对照组(p<0.05);加味四逆散组明显低于模型组,低于吡喹酮组、秋水仙碱组(p<0.05)。(2)脾脏器系数正常对照组最低,模型组、吡喹酮组、加味四逆散组、秋水仙碱组均高于正常对照组(p<0.05);加味四逆散组明显低于模型治疗组、吡喹酮组(p<0.05)。 2.肝功能(1)模型组血清ALT水平最高,与正常对照组相比有统计学意义(p<0.05);加味四逆散组ALT水平较低,与模型组、吡喹酮组比较有统计学意义(p<0.05)。(2)模型组血清ALB明显降低,加味四逆散组ALB高于模型组,低于正常对照组(p<0.05)。 3.血清HA、PCⅢ和肝组织HYp (1)HA水平模型组明显高于各组(p<0.05);加味四逆散组HA水平高于正常组,低于秋水仙碱组、吡喹酮组差别有统计学意义(p<0.05)。(2) PCⅢ水平模型组、吡喹酮组明显高于正常对照组(p<0.05);正常对照组、加味四逆散组之间比较有统计学意义(p<0.05),加味四逆散组低于模型组、秋水仙组、吡喹酮组(p<0.05)。(3)Hyp水平模型组、吡喹酮组、加味四逆散组、秋水仙碱组均显著高于正常对照组(p<0.05);模型组、吡喹酮组、秋水仙碱组之间比较未见统计学意义(p>0.05);加味四逆散组HYp水平低于模型组、吡喹酮组、秋水仙碱组,差异有统计学意义(p<0.05)。 4.各组Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原(1)各组肝组织Ⅰ型胶原积分光密度均值比较:正常对照组明显低于其它各组(p<0.05);加味四逆散组、秋水仙碱组Ⅰ型胶原的表达明显低于模型组、吡喹酮组(p<0.05);加味四逆散组低于秋水仙碱组,两组相比有显著性差异(p<0.05)。(2)各组肝组织Ⅲ型胶原积分光密度均值比较:正常对照组明显低于其它各组(p<0.05);模型组、吡喹酮组之间比较无显著差异(p>0.05)。模型组、吡喹酮组肝组织Ⅲ型胶原的表达较正常对照组、加味四逆散组明显增加(p<0.05);模型组与吡喹酮组之间比较均无统计学意义(p>0.05);加味四逆散组、秋水仙碱组Ⅲ型胶原的表达明显低于模型组、吡喹酮组(p<0.05);加味四逆散组Ⅲ胶原的表达明显低于秋水仙碱组(p<0.05)。 5.小鼠肝组织TGF-β1mRNA各实验组小鼠肝TGF-β1mRNA表达与正常组小鼠比较差别有统计学意义(p<0.05);各治疗组小鼠肝TGF-β1mRNA表达低于模型组(p<0.05);加味四逆散组小鼠肝TGF-β1mRNA表达低于吡喹酮组、秋水仙组(p<0.05)。 结论:1.吡喹酮是杀灭血吸虫的特效药物,小鼠在感染血吸虫后第45天单纯给以一次性灌胃杀虫处理,并不能阻止肝纤维化的继续进展。2.中药加味四逆散联合吡喹酮能改善血吸虫病小鼠肝组织病理,减轻小鼠肝组织纤维化。……   
[关键词]:血吸虫病;肝纤维化;秋水仙碱;吡喹酮;‘加味四逆散
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:湖南中医药大学2010年