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复方丹参对犬牙齿移植作用的实验研究

张海燕

   目的:研究复方丹参在犬牙齿自体移植中的作用,探讨复方丹参对犬移植牙齿牙周组织的影响及可能的机制。 材料与方法:选用五只成年雄性杂种犬做为实验动物,体重10~12kg,随机分为两组:实验组3只,做牙齿自体移植并喂服复方丹参片,一次3片,一日3次;对照组2只,仅做牙齿自体移植。第一天,每只犬各拔除2牙,互相移植入自体同颌对侧相应的牙槽窝内,移植牙齿与邻牙用结扎丝∞结扎,于第10、17、24天同法操作,于第31天处死各犬。五只犬的牙齿移植时间由此分为4个时间段,移植后1周;移植后2周;移植后3周;移植后一月。各犬处死后取其上下颌骨放入中性福尔马林固定液中固定,固定后以牙为单位取颊舌向牙体-牙周联合标本,约1.5×1.0×0.5cm,将所取标本放入10%EDTA脱钙液置于微波炉内脱钙,温度控制在55~65℃之间,脱钙完成后常规脱水、透明、浸蜡、包埋、切片。对每组移植牙的牙体-牙周联合标本进行组织学HE染色;用powervisionTM(PV)二步法对其进行TGF-β1和PCNA的免疫组化染色,并对其进行平均光密度分析。采用统计分析软件SPSS16.0进行统计学分析,统计方法采用重复测量数据的方差分析,LSD两两比较和Pearson相关性分析,检验水准a取0.05。 结果:(1)组织切片HE染色显示实验组骨髓腔中的未分化间充质细胞和骨小梁边缘的成骨细胞数目多,牙周膜中成牙骨质细胞和成纤维细胞数目较多,体积大,核大深染,有较多小血管生成,有明显新生骨基质生成。且在牙齿移植1-4周,移植牙齿牙周组织改建逐渐活跃。对照组骨髓腔中的未分化间充质细胞数目和骨小梁边缘的成骨细胞数目相对较少,体积小,新生骨基质形成较少。(2)PCNA免疫组织化学染色显示:可见在成纤维细胞、骨髓的间充质细胞、血管周围的间充质细胞、血管内壁的血细胞及骨小梁边缘的成骨细胞都有阳性表达,骨基质中的骨细胞偶有阳性表达。实验组的阳性表达明显高于对照组,阳性细胞数量多,体积大,核大深染,两组比较存在统计学差异(P<0.001)。在牙齿移植术后1-4周的时间里随着时间的增加两组的阳性表达均有增加(P<0.001),实验组在第2周、1月时移植牙齿牙周组织中的平均PCNA水平高于第1周和第3周时的平均PCNA水平,在一月时的平均PCNA水平最高。(3)TGF-β1免疫组织化学染色显示:在骨髓的间充质细胞、骨小梁边缘的成骨细胞、血管周围的间充质细胞、血管内壁的红细胞的胞浆都有阳性表达,在成熟的骨细胞中未见有表达,在牙周膜的成纤维细胞的胞浆及细胞外基质中也有阳性表达。实验组的阳性表达明显高于对照组,两组比较有显著差异(P<0.001)。在牙齿移植术后1-4周的时间里随着时间的增加两组的阳性表达均有增加(P<0.001),实验组在3周时阳性表达最强。 结论:PCNA和TGF-β1参与并促进了移植牙齿牙周组织的改建。丹参可能通过增加PCNA和TGF-β1在牙周组织的表达,促进了牙周组织细胞的增殖分化,促进牙周组织的改建。……   
[关键词]:复方丹参;牙齿移植;免疫组化;HE染色;TGF-β_1;PCNA;成骨细胞
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:郑州大学2010年