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~(60)Co-γ照射雄性小鼠建立无精子症动物模型

李锐

   研究背景及目的:无精子症发病原因繁多,且其机制复杂,动物试验是常用的研究手段,尤其近年来干细胞移植的研究愈来愈广泛,建立适宜的雄性不育无精子症动物模型,将为雄性不育的的研究创造有利的条件。目前常用的动物模型建立方法有:喂饲腺嘌呤、实验性精索静脉曲张、环磷酰胺喂饲或腹腔注射等,但多由于诱导追踪时间短(多不足实验动物的一个生精周期),缺乏稳定性,在此平台上进行雄性不育的治疗性实验,其可信度值得商榷。此外,造模过程中的有创性操作及并发的机体其他系统的损伤导致实验动物的死亡率较高,增加了有限的实验成本。性腺组织对放射线比较敏感,尤其以精原细胞和处于分裂状态的精母细胞更敏感。作为射线的一种,60Co-γ临床上多用做肿瘤的放射治疗,然而60Co-γ可直接引起性腺的生精功能损伤甚至丧失。同时,60Co-γ全身照射亦可引起下丘脑、垂体的损伤,引起机体内分泌水平的变化。本试验采用60Co-γ对雄性小鼠生殖系统的影响而达到无精子症,探讨其作用的合适剂量、方法及可能机制,为雄性不育的实验研究提供合适的动物模型的建立方法。 方法:100只昆明小鼠随机分为A组(n=10)、B组(n=15)、C组(n=15)、D组(n=15)、E组(n=15)、F组(n=15)和G组(n=15),A组为空白对照,B组腹腔注射环磷酰胺75mg/(kg·d),连续5d,实验C-G组分别给予60Co-γ5 Gy、6 Gy、7 Gy、8 Gy、6 Gy全身均匀照射1次,G组在照射7d后再次给予60Co-γ4Gy全身均匀照射1次,观察35d;记录小鼠每天的一般状况、体征及体重变化,做受孕试验,三个月后,测量小鼠体重和双侧睾丸重量,并计算睾丸指数;酶联免疫法测定血清FSH、LH、T和E2水平,计算T/E2比值;观察睾丸组织的HE染色病理情况,免疫组化SABC法检测精原细胞表面标记c-kit表达情况。 结果:小鼠照射后,前4h精神紧张、多动、不喜食,随后精神渐萎靡,皮毛无光泽、脱落,恶冷蜷缩;自照射后3d,小鼠开始出现死亡,约10-12d一般情况逐渐恢复,各组数量趋于稳定。C、D、G组死亡率最低(P<0.05),但F、G组可使受孕率降至最低;60Co-γ造成小鼠睾丸组织损伤,睾丸指数明显降低(P<0.05),导致T、E2降低的同时P<0.05),对垂体也会造成损伤,引起FSH、LH的变化(P<0.05);精原细胞表面标记c-kit在A组呈棕褐色环形表达,在其余各组表现为断裂表达或未表达。 结论:60Co-γ以6 Gy和4 Gy分两次间隔照射,可以建立稳定的无精子症动物模型。……   
[关键词]:~(60)Co-γ;雄性不育;无精子症;动物模型
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:郑州大学2010年