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环境中甾体化合物的荧光检测方法的建立与应用

王静华

   睾丸酮丛毛单胞菌(Comamonas testosteroni,C.T.)中的3α-羟基类固醇脱氢酶/碳酰基还原酶(3a-HSD/CR)是降解环境中甾体类化合物的关键酶。本文通过同源整合的方法将绿色荧光蛋白(GFP)基因整合到C.T菌的染色体DNA中的3a-HSD/CR基因下游,得到C.T-GFP突变菌株。该突变株GFP的表达强度与甾体化合物的含量在一定范围内成正相关。比较了CT-GFP细胞体系和非细胞体系在检测甾体化合物时的差别,分别探讨了GFP的荧光强度与甾体化合物的浓度及作用时间关系。结果发现非细胞体系比细胞体系检测系统灵敏度高,并且两种生物检测系统对雌二醇检测灵敏度高于睾丸酮,且灵敏性达到龟级水平。利用非细胞体系检测方法对吉林省主要水源进行了检测分析,并与高效液相色谱法(HPLC)进行了对比,结果显示该方法具有可行性,并且检测的灵敏度高于高效液相方法6个数量级。本文所研究的荧光检测系统具有快速、操作简单、稳定、敏感等特点,为食品安全及环境监测提供新的技术方法。……   
[关键词]:甾体激素;荧光突变菌株;非细胞体系;生物荧光检测方法
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:长春理工大学2010年