手机知网 App
24小时专家级知识服务
打 开
手机知网|搜索

抗甲醛微生物的分离鉴定及其相关基因的克隆

宋鸽

   本研究从家具厂未处理污水中分离具有甲醛抗性的细菌和真菌。主要研究结果如下: 1.抗甲醛细菌的分离与鉴定 分离了8株抗甲醛细菌,6个菌株能在20mmol/L甲醛的平板生长,命名为SG-32、SG-71、SG-87、SG-107、SG-122、SG-135。1个能在10mmol/L的甲醛平板上生长,命名为SG-zong。1个能在4mmol/L甲醛平板上生长,命名为SG-ju。经生理生化分析和分子鉴定,初步确定SG-32、SG-71、SG-87、SG-107、SG-122和SG-135是Pseudomonas putida恶臭假单胞菌。SG-zong是Pseudomonas fluorescens荧光假单胞菌。SG-ju是Acinetobacter johnsonii.约氏不动杆菌。 2.抗甲醛细菌生长特性和抗甲醛能力分析 SG-32、SG-71和SG-107最适生长温度为30℃,SG-135则是35℃。SG-32和SG-135的最适pH值为pH7。SG-71和SG-107的最适pH值为pH8。这4株菌可以耐受并代谢20 -35mmol/l的甲醛。 3.抗甲醛真菌的分离与鉴定 分离了3种抗甲醛真菌,SG-huang、SG-hei和SG-qing。通过形态学观察和分子鉴定,初步确定它们分别是Aspergillus nomius红绶曲霉、Aspergillus versicolor花斑曲霉和Penicillium vinaceum酒色青霉。 4.抗甲醛真菌的生长特性和抗甲醛能力分析 SG-huang、SG-he和SG-qing最适生长温度均为25℃。最适pH值为pH5。这3种真菌都可以降解甲醛,其中SG-huang7天内可降解80mmol/L甲醛,SG-hei7天内可降解50mmol/L甲醛,SG-qing7天内可降解30mmol/L甲醛。它们还能以甲醛作为唯一碳元进行代谢。 5.抗甲醛细菌Gfa基因的克隆 利用PCR法克隆了Pseudomonas putida strain SG-32的Gfa基因。该基因核苷酸序列全长为393bp,编码131个氨基酸。在GenBank进行了登录,序列号为HM016790。BLAST检索分析表明,Pseudomonas putida strain SG-32 Gfa基因与与Pseudomonas putida F1中依赖谷胱甘肽的甲醛激活酶(glutathione-dependent formaldehyde-activating,Gfa)序列同源性96%。该蛋白有4个区域,一个VWFC区,1个C-半胱氨酸节区,1个微管蛋白亚基α、β和γ识别区,1个过敏毒素区。Pseudomonas putida strain SG-32 Gfa基因的克隆,为今后利用该基因进行抗甲醛基因工程奠定了基础。……   
[关键词]:甲醛;抗甲醛细菌;抗甲醛真菌;恶臭假单胞菌;荧光假单胞菌;红绶曲霉;花斑曲霉;酒色青霉;依赖谷胱甘肽的甲醛激活酶(Gfa)
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:哈尔滨师范大学2010年